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weizhi111至尊木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
怎樣提高融合蛋白表達(dá)量 已有6人參與
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| 在BL21菌株中誘導(dǎo)表達(dá)蛋白，用的是GST標(biāo)簽，做了幾次發(fā)現(xiàn)上清里面誘導(dǎo)的蛋白很少，掛柱洗脫后幾乎看不見(jiàn)條帶。沉淀（包涵體）蛋白還比較多。誘導(dǎo)條件試過(guò)IPTG 0.5mM 16度過(guò)夜，但I(xiàn)PTG 改成0.3mM 16度過(guò)夜后總體誘導(dǎo)表達(dá)量就減少了，上清沉淀都少，該怎么解決呢？最后蛋白是要用來(lái)測(cè)酶活的，所以誘導(dǎo)純化過(guò)程不能破壞酶活。請(qǐng)有經(jīng)驗(yàn)者幫助！ |
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21樓2015-08-05 10:39:46
wufeng1991
新蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 158.5
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- 蟲(chóng)號(hào): 3944706
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- 專(zhuān)業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
2樓2015-08-02 21:32:35
weizhi111
至尊木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 11477.9
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- 蟲(chóng)號(hào): 2144809
- 注冊(cè): 2012-11-24
- 專(zhuān)業(yè): 昆蟲(chóng)學(xué)
3樓2015-08-03 08:40:19
wufeng1991
新蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
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- 專(zhuān)業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
4樓2015-08-03 13:11:46
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