 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (3861)
- >導(dǎo)師招生 (459)
- >考研 (381)
- >基金申請(qǐng) (288)
- >文獻(xiàn)求助 (174)
- >考博 (135)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (129)
- >休閑灌水 (56)
- >招聘信息布告欄 (46)
- >論文投稿 (40)
- >論文道賀祈福 (31)
- >博后之家 (27)
- >碩博家園 (27)
- >找工作 (18)
- >SciFinder/Reaxys (17)
- >綠色求助(高懸賞) (12)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1626 | 回復(fù): 3 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿(mǎn)足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話(huà)題的所有回帖 | |||
yyong2新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[交流]
畢赤酵母重組轉(zhuǎn)化子pcr鑒定問(wèn)題 已有3人參與
|
||
|
各位同仁大俠好： 我最近在做給一個(gè)基因的C端加上標(biāo)簽以便于后期蛋白純化研究其結(jié)構(gòu)，采用的是pcr介導(dǎo)的同源重組。目標(biāo)區(qū)域上下游各取51-54bp的同源序列作為pcr引物一部分，另加載體引物22bp，利用攜帶標(biāo)簽和篩選標(biāo)記的質(zhì)粒做模板進(jìn)行pcr擴(kuò)增，pcr產(chǎn)物測(cè)序正確，pcr產(chǎn)物純化后電轉(zhuǎn)化到畢赤酵母X33中，Zeocin篩選，30度培養(yǎng)3天后有轉(zhuǎn)化子出現(xiàn)，搖菌、抽提酵母基因組DNA，以此為模板進(jìn)行pcr，抗性基因有產(chǎn)物，但是跨插入?yún)^(qū)域的引物pcr結(jié)果顯示此區(qū)域沒(méi)有插入（即pcr產(chǎn)物是正常非插入大�。�，再選一個(gè)插入片段內(nèi)的引物和目標(biāo)區(qū)域的組合得不到pcr產(chǎn)物。從抗性篩選標(biāo)記來(lái)說(shuō)目的片段是整合到酵母基因組中的，但是整合位置似乎不在目標(biāo)區(qū)域（因?yàn)閜cr檢測(cè)不到有插入），那能整合到基因組的什么位置呢？不解？？？求解，感謝！我只有一個(gè)金幣全給啊 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有249人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線(xiàn)
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
asdqwer1234
新蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 35.9
- 散金: 125
- 帖子: 182
- 在線(xiàn): 105.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 5300754
- 注冊(cè): 2016-11-30
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
4樓2018-11-14 20:53:58
杜小蕾
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 35.8
- 帖子: 8
- 在線(xiàn): 14.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 3971847
- 注冊(cè): 2015-07-15
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 園藝作物采后生物學(xué)
2樓2017-02-23 15:41:51
皮妮1123
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 2.8
- 散金: 12
- 帖子: 5
- 在線(xiàn): 4.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 5468486
- 注冊(cè): 2017-01-10
- 專(zhuān)業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
3樓2017-06-17 10:55:03
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 346求調(diào)劑[0856] +3 | WayneLim327 2026-03-16 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 085601材料工程專(zhuān)碩求調(diào)劑 +7 | 慕寒mio 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +8 | 妮妮ninicgb 2026-03-15 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑，求各位老師收留 +10 | 秋有木北 2026-03-14 | 10/500 |
|
|
[考研] 085601專(zhuān)碩，總分342求調(diào)劑，地區(qū)不限 +5 | share_joy 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +8 | 戲精丹丹丹 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +5 | △小透明* 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +4 | 睿08 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +9 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +11 | zjl的號(hào) 2026-03-16 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 277調(diào)劑 +5 | 自由煎餅果子 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +8 | 一定有學(xué)上- 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
|
[碩博家園] 湖北工業(yè)大學(xué) 生命科學(xué)與健康學(xué)院-課題組招收2026級(jí)食品/生物方向碩士 +3 | 1喜春8 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +4 | 太陽(yáng)花天天開(kāi)心 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿，福州大學(xué)材料專(zhuān)碩339分求調(diào)劑 +3 | 木子momo青爭(zhēng) 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +5 | 大米飯！ 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085600調(diào)劑 +5 | 漾漾123sun 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +3 | miaodesi 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[碩博家園] 085600 260分求調(diào)劑 +3 | 天空還下雨么 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0817化學(xué)工程與技術(shù)考研312分調(diào)劑 +3 | T123 tt 2026-03-12 | 3/150 |
|