 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4344 | 回復(fù): 32 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
白色實驗服新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
測定土壤酶活力過程中的問題 已有3人參與
|
|
|
小弟最近在測定土壤酶活力，常見的幾種酶。像蔗糖酶（比色法）、脲酶（苯酚鈉-次氯酸鈉比色法）、蛋白酶（茚三酮比色法）、纖維素酶（硝基水楊酸比色法）等…… 但是，在測定蛋白酶的時候出現(xiàn)一系列問題如下： 1：1、蛋白酶測定的時候，實驗組和對照組（無土+無基質(zhì)）全部出現(xiàn)茶色，并沒有出現(xiàn)應(yīng)該出現(xiàn)的藍(lán)紫色，做了四次，全部都是茶色，不知道哪里出現(xiàn)問題了； 2、用酪素做基質(zhì)，波長為500nm，用明膠做基質(zhì)，波長為560nm，請問到底波長用多少合適？ 3、培養(yǎng)結(jié)束后，過濾之前還是之后加入沉淀蛋白質(zhì)的試劑，加入后需不需要離心？離心轉(zhuǎn)速多少？離心在過濾之前還是過濾之后好？ 4、沒有離心，培養(yǎng)后直接過濾，過濾速度很慢（超級慢的那一種），這個現(xiàn)象合理不合理，如果不合理，該怎么做？ 5、用酪素做基質(zhì)，標(biāo)準(zhǔn)曲線用甘氨酸繪制？還是酪氨酸繪制？明膠做基質(zhì)曲線用什么繪制呢？（查閱了很多文獻(xiàn)，方法有的各不相同，希望大神解答……） 我用茚三酮比色法（酪素基質(zhì)），測定波長為500nm；加勒斯江法（明膠基質(zhì)），測定波長為560nm；實驗還是不出結(jié)果，希望蟲友幫助，小弟不勝感激…… 在測定纖維素酶活力的時候，出現(xiàn)過濾很慢（無法想象的慢，甚至我懷疑過濾都停止了），不知道離心或者用布氏漏斗可以不可以（今天打算試一下的）……或者蟲友有更好的解決辦法。 第一次發(fā)帖，不便之處請見諒。剛簽到三天，金幣不多……希望大家能幫小弟解決這些問題，在線等。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
08工學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
350求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
求調(diào)劑一志愿武漢理工大學(xué)材料工程（085601）
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境，總分308求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
接收2026碩士調(diào)劑(學(xué)碩+專碩)
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
081700 調(diào)劑 267分
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
328求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
0854 考研調(diào)劑 招生了！AI 方向
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
招08考數(shù)學(xué)
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
一志愿上海交大生物與醫(yī)藥專碩324分，求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 【分享】2009年注冊環(huán)保工程師基礎(chǔ)考試大綱
已經(jīng)有11人回復(fù)
我是一粒沙
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 21.5
- 帖子: 36
- 在線: 35.1小時
- 蟲號: 2485840
- 注冊: 2013-05-28
- 性別: MM
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
3樓2015-08-25 14:04:53
白色實驗服
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 26.5
- 帖子: 11
- 在線: 6.2小時
- 蟲號: 4032728
- 注冊: 2015-08-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 林業(yè)研究的新技術(shù)與新方法
2樓2015-08-25 12:51:38
autumuer
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 845.6
- 帖子: 98
- 在線: 21.1小時
- 蟲號: 2586168
- 注冊: 2013-08-07
- 專業(yè): 作物栽培與耕作學(xué)
4樓2015-08-25 16:07:45
白色實驗服
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 26.5
- 帖子: 11
- 在線: 6.2小時
- 蟲號: 4032728
- 注冊: 2015-08-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 林業(yè)研究的新技術(shù)與新方法
|
土壤脲酶的測定方法（苯酚鈉—次氯酸鈉比色法） 1、試劑 1）甲苯； 2）10%尿素：稱取10g尿素，用水溶至100ml； 3）檸檬酸鹽緩沖液（PH6.7）：184g檸檬酸和147.5g氫氧化鉀（KOH）溶于蒸餾水。將兩溶液合并（會暴沸，混合時要注意），用1mol/LNaOH將PH調(diào)至6.7，用水稀釋定容至1000ml； 4）苯酚鈉溶液（1.35mol/L）：62.5g苯酚溶于少量乙醇，加2ml甲醇和18.5ml丙酮，用乙醇稀釋至100ml（A液），存于冰箱中；27gNaOH溶于100ml水（B液）。將A、B溶液保存在冰箱中。使用前將A液、B液各20ml混合，用蒸餾水稀釋至100ml； 5）次氯酸鈉溶液：用水稀釋試劑，至活性氯的濃度為0.9%，溶液穩(wěn)定； 6）氮的標(biāo)準(zhǔn)溶液： 精確稱取0.4717g硫酸銨溶于水并稀釋至1000ml，得到1ml含有0.1mg氮的標(biāo)準(zhǔn)液；再將此液稀釋10倍（吸取10ml標(biāo)準(zhǔn)液定容至100ml）制成氮的工作液（0.01mg/ml）。 2、操作步驟 稱取5g土樣于50ml三角瓶中，加1ml甲苯，振蕩均勻，15min后加10ml10%尿素溶液和20ml PH 6.7檸檬酸鹽緩沖溶液，搖勻后在37℃恒溫箱培養(yǎng)24小時。培養(yǎng)結(jié)束后過濾，過濾后取1ml濾液加入50ml容量瓶中，再加4ml苯酚鈉溶液和3ml次氯酸鈉溶液，隨加隨搖勻。20min后顯色，定容。1h內(nèi)在分光光度計與578nm波長處比色。（靛酚的藍(lán)色在1h內(nèi)保持穩(wěn)定）。 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：在測定樣品吸光值之前，分別取0、1、3、5、7、9、11、13ml氮工作液，移于50ml容量瓶中，然后補(bǔ)加蒸餾水至20ml。再加入4ml苯酚鈉溶液和3ml次氯酸鈉溶液，隨加隨搖勻。20min后顯色，定容。1h內(nèi)在分光光度計上于578nm波長處比色。然后以氮工作液濃度為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 3、結(jié)果計算： 以24小時后1g土壤中NH3－N的毫克數(shù)表示土壤脲酶活性（Ure）。 Ure=（a樣品－a無土－a無基質(zhì)）×V×n／m式中：a樣品為樣品吸光值由標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的NH3－N毫克數(shù)；a無土為無土對照吸光值由標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的NH3－N毫克數(shù)； a無基質(zhì)為無基質(zhì)對照吸光值由標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的NH3－N毫克數(shù)； V為顯色液體積；n為分取倍數(shù)，浸出液體積／吸取濾液體積；m表示烘干土重 |
5樓2015-08-25 16:07:46
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +8 | 困于星晨 2026-03-17 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 263求調(diào)劑 +6 | yqdszhdap－ 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)308分求調(diào)劑 +5 | 你好明天你好 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué) 070300 學(xué)碩 336分 求調(diào)劑 +5 | vv迷 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 352求調(diào)劑 +3 | 大米飯！ 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 石河子大學(xué)（211、雙一流）碩博研究生長期招生公告 +3 | 李子目 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中農(nóng)業(yè)071010，總分320求調(diào)劑 +5 | 困困困困坤坤 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)調(diào)劑 +5 | Surekei 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)一志愿985，分?jǐn)?shù)349求調(diào)劑 +4 | zxts12 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 初試 317 +7 | 半拉月丙 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩333求調(diào)劑 +3 | 北道巷 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0805材料320求調(diào)劑 +3 | 深海物語 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)學(xué)碩080502 337求調(diào)劑-一志愿華中科技大學(xué) +4 | 順順順mr 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 二本跨考鄭大材料306英一數(shù)二 +3 | z1z2z3879 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿:南京航空航天大學(xué)大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩，總分289分 +4 | @taotao 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 295材料求調(diào)劑，一志愿武漢理工085601專碩 +5 | Charlieyq 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿中國海洋大學(xué)，生物學(xué)，301分，求調(diào)劑 +5 | 1孫悟空 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 【同濟(jì)軟件】軟件（085405）考研求調(diào)劑 +3 | 2026eternal 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 有沒有道鐵/土木的想調(diào)劑南林，給自己招師弟中～ +3 | TqlXswl 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 淇ya_~ 2026-03-17 | 5/250 |
|