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hxx593847830新蟲 (小有名氣)
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[求助]
細(xì)菌生長曲線的問題 已有3人參與
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同志們好,我利用分光光度計(jì)OD600測定細(xì)菌的生長曲線,現(xiàn)在連續(xù)測了28個(gè)小時(shí)了,OD600還在繼續(xù)升高。我通過各種稀釋倍數(shù)使OD600在0.2到0.8之間,現(xiàn)在繪制曲線時(shí)乘以稀釋倍數(shù)后所得吸光度值已經(jīng)達(dá)到6.0即將奔向7.0了,請問各位大神,我這是不是出了什么問題?有沒有必要繼續(xù)測下去還是重新做這個(gè)實(shí)驗(yàn)??![]() ![]() |
專家顧問 (職業(yè)作家)
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專家經(jīng)驗(yàn): +702 |
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生長曲線是生長速率和時(shí)間的曲線,不是時(shí)間和OD的曲線吧,OD的數(shù)值表示的是菌的密度,不是菌的生長速度吧。 建議用每個(gè)時(shí)間段0D的增長數(shù)量和時(shí)間來做曲線。比如第個(gè)小時(shí)的增加0D值就等于第2個(gè)小時(shí)測的值減去第一個(gè)小時(shí)測的0D值。比如1小時(shí)測5,2小時(shí)測試10 ,那對應(yīng)得2小時(shí)的縱坐標(biāo)是5而非10,。 建議:1,理解生長曲線是什么? 2.0D變化是什么,? 3.比生長速度在0D值上的體現(xiàn),什么計(jì)算? 祝順利。 |
新蟲 (小有名氣)
| 初試的菌液OD值是多少?而且要確定以及排除所用的培養(yǎng)基中沒有吸光物質(zhì),不然OD值也會變大。我測過的菌的最大OD值在3到3.5左右,看過文獻(xiàn)中寫的指數(shù)后期的OD值在4左右,不同的菌OD值確實(shí)會不同。還有一點(diǎn),要排除所測菌液被污染的可能,建議樓主在排除培養(yǎng)液沒有吸光物質(zhì)的前提下重新做,確定所測數(shù)值的準(zhǔn)確性。一個(gè)實(shí)驗(yàn)獨(dú)立進(jìn)行三遍以上才有意義。 |
木蟲 (小有名氣)
金蟲 (初入文壇)
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OD600的生長極限和培養(yǎng)基有關(guān)系,用LB一般到4。SOB,SOC,YPD,MDG一般可以到8。ZYM系列的培養(yǎng)基能到20,帶HD的可以到40。如果是LB能達(dá)到6以上了,那么恭喜樓主,你有幾高的養(yǎng)菌天賦。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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