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biyygyxkjsun鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
關于siRNA與shRNA的選擇問題 已有2人參與
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| 我打算開展細胞干擾試驗，因為我做用的細胞為鴨的原代成肌細胞，轉染方式為脂質體轉染。所以不知道該選擇哪一種干擾方式合適？目前已了解到，shRNA相對較難轉染入至原代細胞中，但也不知道siRNA是否相對較為容易轉入細胞中。病毒干擾載體是不考慮的，太貴了。懇請各位大俠指導下小弟。 |
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 miRNA分子生物學研究 |
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- 專業(yè): 病毒學
【答案】應助回帖
感謝參與，應助指數 +1
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siRNA 是合成的，從公司買回來，可以直接用于短暫性的轉染，用完就沒有了。優(yōu)點是快速便利。 shRNA 是基于質粒的。需要自己克隆，也有公司賣不過較自己克隆要貴得多。 因為是質粒，所以可以無限制的擴增，不會有用完的一天。 質粒的轉染效率跟siRNA類似，不過shRNA被表達出來需要時間，所以效果可能沒有siRNA直接快速。 但是shRNA質粒一般含有抗生素選擇基因，這就允許你篩選穩(wěn)定細胞系，不過這個很花時間（1-3個月） 不過一旦穩(wěn)定細胞系篩選成功，你就再不用做轉染實驗了，一勞永逸。 所以兩者各有所長，要看你的實驗性質。 如果只是補個數據，果斷用siRNA。如果建立起穩(wěn)定細胞體系以后還有很多實驗，建議用shRNA。 |
2樓2015-09-03 19:41:34
雨夜帶傘
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3樓2016-05-06 18:04:04
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5樓2019-10-16 15:03:53
6樓2019-12-07 19:01:10
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