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biyygyxkjsun鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于siRNA與shRNA的選擇問題 已有2人參與
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| 我打算開展細(xì)胞干擾試驗(yàn)，因?yàn)槲易鲇玫募?xì)胞為鴨的原代成肌細(xì)胞，轉(zhuǎn)染方式為脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染。所以不知道該選擇哪一種干擾方式合適？目前已了解到，shRNA相對較難轉(zhuǎn)染入至原代細(xì)胞中，但也不知道siRNA是否相對較為容易轉(zhuǎn)入細(xì)胞中。病毒干擾載體是不考慮的，太貴了。懇請各位大俠指導(dǎo)下小弟。 |
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 miRNA分子生物學(xué)研究 |
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銅蟲 (小有名氣)
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5樓2019-10-16 15:03:53
evangelina
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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siRNA 是合成的，從公司買回來，可以直接用于短暫性的轉(zhuǎn)染，用完就沒有了。優(yōu)點(diǎn)是快速便利。 shRNA 是基于質(zhì)粒的。需要自己克隆，也有公司賣不過較自己克隆要貴得多。 因?yàn)槭琴|(zhì)粒，所以可以無限制的擴(kuò)增，不會(huì)有用完的一天。 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染效率跟siRNA類似，不過shRNA被表達(dá)出來需要時(shí)間，所以效果可能沒有siRNA直接快速。 但是shRNA質(zhì)粒一般含有抗生素選擇基因，這就允許你篩選穩(wěn)定細(xì)胞系，不過這個(gè)很花時(shí)間（1-3個(gè)月） 不過一旦穩(wěn)定細(xì)胞系篩選成功，你就再不用做轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)了，一勞永逸。 所以兩者各有所長，要看你的實(shí)驗(yàn)性質(zhì)。 如果只是補(bǔ)個(gè)數(shù)據(jù)，果斷用siRNA。如果建立起穩(wěn)定細(xì)胞體系以后還有很多實(shí)驗(yàn)，建議用shRNA。 |
2樓2015-09-03 19:41:34
4樓2016-07-28 11:21:03
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