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biyygyxkjsun鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于siRNA與shRNA的選擇問題 已有2人參與
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| 我打算開展細胞干擾試驗,因為我做用的細胞為鴨的原代成肌細胞,轉(zhuǎn)染方式為脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染。所以不知道該選擇哪一種干擾方式合適?目前已了解到,shRNA相對較難轉(zhuǎn)染入至原代細胞中,但也不知道siRNA是否相對較為容易轉(zhuǎn)入細胞中。病毒干擾載體是不考慮的,太貴了。懇請各位大俠指導(dǎo)下小弟。 |
miRNA分子生物學研究 |

無蟲 (小有名氣)
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siRNA 是合成的,從公司買回來,可以直接用于短暫性的轉(zhuǎn)染,用完就沒有了。優(yōu)點是快速便利。 shRNA 是基于質(zhì)粒的。需要自己克隆,也有公司賣不過較自己克隆要貴得多。 因為是質(zhì)粒,所以可以無限制的擴增,不會有用完的一天。 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染效率跟siRNA類似,不過shRNA被表達出來需要時間,所以效果可能沒有siRNA直接快速。 但是shRNA質(zhì)粒一般含有抗生素選擇基因,這就允許你篩選穩(wěn)定細胞系,不過這個很花時間(1-3個月) 不過一旦穩(wěn)定細胞系篩選成功,你就再不用做轉(zhuǎn)染實驗了,一勞永逸。 所以兩者各有所長,要看你的實驗性質(zhì)。 如果只是補個數(shù)據(jù),果斷用siRNA。如果建立起穩(wěn)定細胞體系以后還有很多實驗,建議用shRNA。 |
銅蟲 (小有名氣)
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