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sonny金蟲 (著名寫手)
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[交流]
關(guān)于轉(zhuǎn)染的一些問題,求討論!
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目前在用Flp-In TRex-293做可誘導(dǎo)表達的穩(wěn)轉(zhuǎn)表達系,該細胞正常培養(yǎng)需要Zeocin和Blasticidin兩種選擇抗性維持,轉(zhuǎn)染進外源重組質(zhì)粒后,定點插入后會導(dǎo)致Zeocin抗性消失,獲得Hygromycin B抗性,而Blasticidin抗性一直存在。 我的問題是:在做轉(zhuǎn)染過程中,是否需要加入Blasticidin抗生素?? |
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無蟲 (小有名氣)
鐵蟲 (初入文壇)
木蟲 (正式寫手)
小蟲
| 樓主要做什么轉(zhuǎn)染瞬時轉(zhuǎn)染還是要進行穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系構(gòu)建,轉(zhuǎn)染這個過程是不需要抗性的,等轉(zhuǎn)染結(jié)束了換培養(yǎng)基可以加入抗性,穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選的話將目的基因整合到細胞自身的基因組上,樓主說的定點插入導(dǎo)致抗性消失是否可以避免。。 |

金蟲 (著名寫手)
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