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黎花夢(mèng)香新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
將細(xì)胞接種到96孔板貼壁后，怎么將96孔板中的細(xì)胞消化下來(lái) 已有3人參與
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| 將細(xì)胞鋪于96孔板，并培養(yǎng)貼壁后，怎么將96孔板中的細(xì)胞消化下來(lái)，我想給藥之后將細(xì)胞破碎，再進(jìn)行下步實(shí)驗(yàn)的，能告訴我具體步驟嗎？ |
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evangelina
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2樓2015-09-10 10:54:31
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
黎花夢(mèng)香: 金幣+2, ★有幫助 2015-09-11 09:45:13
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黎花夢(mèng)香: 金幣+2, ★有幫助 2015-09-11 09:45:13
| 換掉培養(yǎng)液，蝗蟲(chóng)也洗2次，胰蛋白酶消化，你要給藥之后再破碎蛋白？你是做細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染嗎，你說(shuō)的給藥是壓力篩選嗎，你要是想檢測(cè)蛋白，直接破碎即可，不需給藥了~ |
3樓2015-09-10 14:46:14
黎花夢(mèng)香
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4樓2015-09-10 16:11:09
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5樓2015-09-10 16:16:00
evangelina
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黎花夢(mèng)香(wizardfan代發(fā)): 金幣+2, 感謝應(yīng)助 2015-09-12 10:41:30
黎花夢(mèng)香(wizardfan代發(fā)): 金幣+2, 感謝應(yīng)助 2015-09-12 10:41:30
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我沒(méi)有做過(guò)96孔的，因?yàn)橛X(jué)得自己的手沒(méi)那么靈巧，我做過(guò)最小是48孔的 48孔養(yǎng)細(xì)胞放300ul培養(yǎng)液，洗PBS一樣300ul兩次，胰酶100ul，消化時(shí)間要在顯微鏡下判斷 既然你只需要收集細(xì)胞，胰酶處理過(guò)了點(diǎn)也沒(méi)什么問(wèn)題 然后再加200ul培養(yǎng)液去中和胰酶 再就直接用槍打下來(lái)吸走，從不同方向上下吹十來(lái)次，應(yīng)該大部分都下來(lái)了 96孔應(yīng)該要更少吧 |
6樓2015-09-10 16:30:08
7樓2015-09-10 16:45:20
黎花夢(mèng)香
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8樓2015-09-11 09:35:01
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