 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1414 | 回復(fù): 16 | ||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||||
xiamuxi新蟲(chóng) (小有名氣)
|
[交流]
克隆相關(guān) 已有8人參與
|
|||
我現(xiàn)在在做分子克隆的實(shí)驗(yàn)，骨架和片段都是用ASCI酶切的，大小分別是：6219bp、6422bp，T4連接酶連，16度5、6個(gè)小時(shí)或者過(guò)夜，骨架和片段體積比是1:7，長(zhǎng)斑的情況不定，有時(shí)多有時(shí)少，做菌液電泳有時(shí)候有滯后的但酶切檢測(cè)不對(duì)，做了三個(gè)多月了， ，擔(dān)心我的畢業(yè) 望大家給些高見(jiàn)啊 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 蟲(chóng)友問(wèn)答-分子生物 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有177人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
dorecnu
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 31 (小學(xué)生)
- 金幣: 2336.7
- 紅花: 10
- 帖子: 785
- 在線: 93.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 448155
- 注冊(cè): 2007-11-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
★ ★ ★ ★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-09-28 22:55:11
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-09-28 22:55:11
|
PCR產(chǎn)物是否是回收后直接酶切？如果是請(qǐng)將片段連到simple 19T載體上之后再酶切。 新手往往覺(jué)得我在PCR引物末端設(shè)計(jì)了酶切位點(diǎn)和保護(hù)堿基就萬(wàn)事大吉了，實(shí)際經(jīng)驗(yàn)是NONONO 在載體和片段連接過(guò)程中有一個(gè)重要的環(huán)節(jié)是酶切位點(diǎn)是否都完整，PCR產(chǎn)物直接酶切的 弊端是不知道插入 片段酶切位點(diǎn)的狀況。先將片段鏈接到T載體后酶切，可以清楚的獲得這一狀態(tài)。 然后在將載體用堿性磷酸酶去磷酸化后按載體：片段=1：3的比例連接。 先連T載體看起來(lái)繁瑣，實(shí)際上每個(gè)過(guò)程都能檢測(cè)，實(shí)際上有助于后續(xù)實(shí)驗(yàn)更快的進(jìn)行。 連接酶在室溫工作挺好，且可以節(jié)約時(shí)間。 |
7樓2015-09-28 19:44:08
wuyuanqing
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 4703.7
- 散金: 50
- 紅花: 3
- 帖子: 458
- 在線: 243.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1210774
- 注冊(cè): 2011-02-23
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物遺傳育種學(xué)
2樓2015-09-25 23:23:27
iszku
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 935.8
- 帖子: 11
- 在線: 29.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 4022878
- 注冊(cè): 2015-08-15
- 專業(yè): 腫瘤學(xué)
3樓2015-09-26 03:10:58
海里的淡水魚(yú)
禁蟲(chóng) (小有名氣)
★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
4樓2015-09-26 09:28:30
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 +3 | α____ 2026-03-22 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 287求調(diào)劑 +8 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
[考研] 環(huán)境學(xué)碩288求調(diào)劑 +6 | 皮皮皮123456 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)調(diào)劑 +5 | Surekei 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | Zhangbod 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +6 | ytter 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 384求調(diào)劑 +3 | 子系博 2026-03-22 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 13341 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +9 | 煙火先于春 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0805材料320求調(diào)劑 +3 | 深海物語(yǔ) 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)319求調(diào)劑 +7 | 錦鯉0909 2026-03-17 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +3 | 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 司空. 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿南京航空航天大學(xué)289分 +3 | @taotao 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | eation27 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 08工學(xué)調(diào)劑 +5 | 用戶573181 2026-03-20 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856調(diào)劑，是學(xué)校就去 +8 | sllhht 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑，一志愿華南理工大學(xué)071005 +5 | ioodiiij 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語(yǔ)六級(jí)551，有科研經(jīng)歷 +4 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-16 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 本科鄭州大學(xué)物理學(xué)院，一志愿華科070200學(xué)碩，346求調(diào)劑 +4 | 我不是一根蔥 2026-03-18 | 4/200 |
|