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A張盈銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助RNA提取電泳圖分析 已有4人參與
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有哪位大神幫忙分析下，我是提的放線菌中的RNA，第一個膠孔是2000的maker，總感覺跑出的條帶對應(yīng)的大小不太對，哪位大神幫忙分析下，謝謝 IMG_20150929_112015.jpg |
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12樓2015-09-30 18:43:00
然處
金蟲 (小有名氣)
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2樓2015-09-29 16:58:58
dorecnu
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2015-09-29 22:34:38
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2015-09-29 22:34:38
| 理想的RNA提取條帶應(yīng)該是三條28S,18S,5S亮度上應(yīng)該依次減弱28S最亮，18S次之，5S最弱。但是在實際試驗中我們往往只能獲得兩條條帶，這取決于你后續(xù)的實驗精度要求，如果是普通的定量PCR的話，我倒是建議你先將這個RNA反轉(zhuǎn)錄進(jìn)行后續(xù)的實驗，看看結(jié)果如何。有的物種RNA提取條帶因為復(fù)雜的原因不能呈現(xiàn)典型的三條帶，但并不影響后續(xù)的實驗。我就有師姐一直糾結(jié)與RNA條帶不清晰，但是我們后續(xù)進(jìn)行芯片雜交的時候發(fā)現(xiàn)也能滿足分析的要求。所以我也建議你先進(jìn)行后續(xù)的實驗看看，莫糾結(jié)。另外，從電泳圖上看，凝膠孔有雜質(zhì)，是蛋白污染的可能性比較大，所以建議你采取相應(yīng)的前處理措施。 |
3樓2015-09-29 17:08:10
DanceMacabre
新蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2015-09-29 22:34:58
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2015-09-29 22:34:58
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膠的濃度，配1.5的膠。電泳時間，3min。RNA提取過程，在冰上低溫;加乙醇洗滌后，加水溶解時，在超凈臺搞。做實驗時，穿實驗服，戴口罩。結(jié)果包你滿意。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2015-09-29 17:55:46
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