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A張盈銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助RNA提取電泳圖分析 已有4人參與
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有哪位大神幫忙分析下,我是提的放線菌中的RNA,第一個(gè)膠孔是2000的maker,總感覺跑出的條帶對(duì)應(yīng)的大小不太對(duì),哪位大神幫忙分析下,謝謝 IMG_20150929_112015.jpg |
新蟲 (初入文壇)
金蟲 (小有名氣)
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rna有些降解,分子大小的話,用marker對(duì)比也不太正確,畢竟dna和rna還有有結(jié)構(gòu)上的差別的 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |

木蟲 (正式寫手)
| 理想的RNA提取條帶應(yīng)該是三條28S,18S,5S亮度上應(yīng)該依次減弱28S最亮,18S次之,5S最弱。但是在實(shí)際試驗(yàn)中我們往往只能獲得兩條條帶,這取決于你后續(xù)的實(shí)驗(yàn)精度要求,如果是普通的定量PCR的話,我倒是建議你先將這個(gè)RNA反轉(zhuǎn)錄進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn),看看結(jié)果如何。有的物種RNA提取條帶因?yàn)閺?fù)雜的原因不能呈現(xiàn)典型的三條帶,但并不影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。我就有師姐一直糾結(jié)與RNA條帶不清晰,但是我們后續(xù)進(jìn)行芯片雜交的時(shí)候發(fā)現(xiàn)也能滿足分析的要求。所以我也建議你先進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)看看,莫糾結(jié)。另外,從電泳圖上看,凝膠孔有雜質(zhì),是蛋白污染的可能性比較大,所以建議你采取相應(yīng)的前處理措施。 |
新蟲 (小有名氣)
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膠的濃度,配1.5的膠。電泳時(shí)間,3min。RNA提取過程,在冰上低溫;加乙醇洗滌后,加水溶解時(shí),在超凈臺(tái)搞。做實(shí)驗(yàn)時(shí),穿實(shí)驗(yàn)服,戴口罩。結(jié)果包你滿意。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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