 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 5547 | 回復: 39 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[求助]
畢赤酵母高拷貝篩選 已有2人參與
|
|||
|
如題，本人新手，做蛋白分子改造的，之前將目的基因構(gòu)建在pPICZaA和pGAPZaA上并利用博萊霉素篩選高拷貝，濃度達到1ug/ml，菌落PCR后挑取陽性菌落搖瓶表達，結(jié)果表達量極低�，F(xiàn)在改變策略構(gòu)建到pPIC9K上用G418篩選高拷貝，想問問各位達人G418能不能和氨芐同時使用，因為之前做的時候涂布His+轉(zhuǎn)化子的G418平板老是不長酵母而長雜菌。另外還想問問是不是帶有his tag的蛋白酵母的表達量會降低？因為我想要拿比較高表達量的菌株對該蛋白進行表征。有文獻建議His+轉(zhuǎn)化子不經(jīng)過G418篩選高拷貝而直接以深孔板培養(yǎng)篩選高表達量菌株，各位覺得哪種方法更靠譜呢？在同一個梯度的平板上，各菌株的表達量差異會否很大？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
回復此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 蛋白表達純化鑒定精華 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有227人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
-
留學--博士招生
已經(jīng)有16人回復
-
化學工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復
-
邵陽學院食品與化學工程學院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復
-
湖北師范大學招調(diào)劑啦
已經(jīng)有3人回復
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- ppic9k轉(zhuǎn)GS115篩選表達問題。
已經(jīng)有4人回復
- 想做畢赤酵母的高拷貝表達
已經(jīng)有2人回復
- 酵母表型篩選那塊
已經(jīng)有0人回復
- 基因工程課程小結(jié)
已經(jīng)有20人回復
- 【求助/交流】求高人指點，畢赤酵母和釀酒酵母
已經(jīng)有2人回復
duoyidian
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 2609.1
- 紅花: 1
- 帖子: 317
- 在線: 238.3小時
- 蟲號: 2347348
- 注冊: 2013-03-14
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
10樓2015-10-07 10:47:53
★
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2015-10-07 22:53:11
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2015-10-07 22:53:11
|
梯度加壓，增加zeocin濃度，篩選到2000的濃度，調(diào)取克隆進行表達小試進一步篩選。根據(jù)經(jīng)驗，高濃度板子上長出來的克隆表達量不見得高，曾有過不表達的情況。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2015-10-05 00:11:58
3樓2015-10-05 00:25:14
3976084924樓2015-10-05 12:29:11
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料科學與工程調(diào)劑 +9 | 深V宿舍吧 2026-03-30 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料與化工調(diào)劑一志愿大連海事085600，349 +5 | 吃的不少 2026-03-30 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 哈爾濱工業(yè)大學材料與化工專碩378求調(diào)劑 +3 | 塔比烏斯 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +8 | Y-cap 2026-03-29 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +4 | GK72 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +17 | 田洪有 2026-03-26 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 材料化工340求調(diào)劑 +3 | jhx777 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 071010 323 分求調(diào)劑 +3 | Baekzhy 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 南京大學化學調(diào)劑 +10 | 景隨風 2026-03-29 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 085404求調(diào)劑，總分309，本科經(jīng)歷較為豐富 +6 | 來財aa 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京理工大學本科211材料工程294求調(diào)劑 +8 | mikasa的圍巾 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 332求92調(diào)劑 +8 | 蕉蕉123 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085600，專業(yè)課化工原理，321分求調(diào)劑 +5 | 大饞小子 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +7 | 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0856，材料與化工321分求調(diào)劑 +12 | 大饞小子 2026-03-27 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 348求調(diào)劑 +4 | 小懶蟲不懶了 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +10 | 呼呼？~+123456 2026-03-24 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +3 | 李嘉圖·S·路 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑求收留 +7 | 果然有我 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 085602化學工程求調(diào)劑。
+4
|
平樂樂樂 2026-03-26 | 4/200 |
|