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歡開無語新蟲 (初入文壇)
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非變性聚丙烯酰胺電泳染色 已有3人參與
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請(qǐng)問各位大俠，我電泳的膠，染色后倒入顯色液的瞬間就全部變黑了是怎么回事呢，重新試過幾次，還是一樣的效果，這個(gè)什么原因?qū)е碌模�？？？�?qǐng)教一下大家啊，實(shí)在是不知道原因。 201408101436503082.jpg |
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3樓2015-10-25 21:07:56
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應(yīng)該不是染色液配濃了，我之前一直用的一樣的濃度，沒有問題，也漂洗過，這是今天的，把顯色的藥品全換成新的了，還是一樣的結(jié)果 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2015-10-26 18:50:27
杜仲谷
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一、銀染前準(zhǔn)備 1. 銀染水質(zhì)很重要，最好全部雙蒸水或去離子水。 2. 裝膠的器皿清晰干凈，最后雙蒸水多沖幾遍。 3. 操作時(shí)戴手套，不然gel上會(huì)有大手印。 4. 跑膠時(shí)我采用大梳子，小樣本量。因?yàn)殂y染本身分辨率就很高，樣本量太大時(shí)雜帶太濃。小梳子的條帶比較模糊。如圖 二、銀染過程 1. 電泳結(jié)束后，自來水沖洗玻璃板兩面，預(yù)冷，剝下凝膠，雙蒸水洗滌兩次。 2. 浸沒于0.1% 的AgNO3溶液中，搖床銀染10分鐘。 注意事項(xiàng)： a. 時(shí)間。銀染時(shí)間可延遲到15分鐘，但是千萬不要超過20分鐘，否則膠的背景極深，一個(gè)字，丑。 b.濃度。硝酸銀溶液濃度不宜超過0.15%，我的經(jīng)驗(yàn)表明，AgNO3濃度越高，膠越黃越丑。 3. 雙蒸水沖洗兩次，1min。 注意事項(xiàng)： a. 充分的漂洗可以降低背景色。因此漂洗時(shí)間一定要到1min 4. 浸沒于1.2% NaOH+ 0.4% 甲醛溶液中顯影，看到模糊的條帶后立即大量雙蒸水沖洗，中止顯影。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2015-10-26 23:12:31
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