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酶解緩沖液及酶解過(guò)程中pH如何控制 已有3人參與
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用堿性蛋白酶酶解，該酶的最適pH為8.5，需要pH8.5的緩沖液，有如下幾個(gè)問(wèn)題： 1)堿性緩沖液有硼酸-硼砂緩沖液，tris-鹽酸緩沖液符合8.5的pH要求，這兩種緩沖液都可以么？對(duì)產(chǎn)物的活性哪個(gè)影響小一點(diǎn)？ 2)如果要比較不同pH條件下酶解產(chǎn)物的活性，如pH8.5,9,9.5，前兩種緩沖液可以用硼酸-硼砂緩沖液，但是該緩沖液達(dá)不到9.5的要求，那用硼砂-氫氧化鈉緩沖液來(lái)配置，會(huì)有影響么？ 3)酶解過(guò)程中要始終保持某一pH不變，文獻(xiàn)里說(shuō)要加入1mol/L的氫氧化鈉始終保持起始pH，這個(gè)如何操作？是在酶解過(guò)程中不停地測(cè)定pH么？ 4)酶解過(guò)程需要一直攪拌么？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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軟弱仙人掌(99503102代發(fā)): 金幣+5, 謝謝應(yīng)助，請(qǐng)繼續(xù)為其他蟲(chóng)友解答噢！ 2015-11-06 13:55:15
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1）不同的物質(zhì)對(duì)應(yīng)最適緩沖液也不一樣，你的問(wèn)題別人無(wú)法給你確定的解答，這個(gè)你自己試驗(yàn)下不就完事了么，事實(shí)大于雄辯。 2）用氫氧化鈉的緩沖液，行不行先試驗(yàn)。多動(dòng)手。 3）酶反應(yīng)過(guò)程控制PH的方式有很多，補(bǔ)堿或補(bǔ)酸，怎么補(bǔ)，看你的實(shí)驗(yàn)條件，反應(yīng)釜自帶PH計(jì)，有自動(dòng)控制流加酸堿的蠕動(dòng)泵，要么小實(shí)驗(yàn)就把PH開(kāi)著放進(jìn)反應(yīng)溶液中，隨時(shí)觀察，隨時(shí)調(diào)節(jié)。 4）當(dāng)然需要一直攪拌。哎，小朋友多試驗(yàn)。祝順利。 |
2樓2015-11-05 09:17:49
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實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有酶解釜，只能在水浴鍋里攪拌酶解，這個(gè)過(guò)程調(diào)節(jié)pH需要手動(dòng)，難道要十幾分鐘就要調(diào)一下pH么 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
3樓2015-11-05 13:17:33
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5樓2015-11-06 16:53:35
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不用緩沖液，酶解之后不也得除鹽么？而且即使用緩沖液，酶解過(guò)程pH也會(huì)發(fā)生變化的。我現(xiàn)在用透析的方法除鹽，每次處理的量好少啊 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
6樓2015-11-06 20:38:51
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7樓2015-11-09 16:46:47
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8樓2017-11-14 14:25:31
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