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酶解緩沖液及酶解過程中pH如何控制 已有3人參與
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用堿性蛋白酶酶解，該酶的最適pH為8.5，需要pH8.5的緩沖液，有如下幾個問題： 1)堿性緩沖液有硼酸-硼砂緩沖液，tris-鹽酸緩沖液符合8.5的pH要求，這兩種緩沖液都可以么？對產(chǎn)物的活性哪個影響小一點？ 2)如果要比較不同pH條件下酶解產(chǎn)物的活性，如pH8.5,9,9.5，前兩種緩沖液可以用硼酸-硼砂緩沖液，但是該緩沖液達不到9.5的要求，那用硼砂-氫氧化鈉緩沖液來配置，會有影響么？ 3)酶解過程中要始終保持某一pH不變，文獻里說要加入1mol/L的氫氧化鈉始終保持起始pH，這個如何操作？是在酶解過程中不停地測定pH么？ 4)酶解過程需要一直攪拌么？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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軟弱仙人掌(99503102代發(fā)): 金幣+5, 謝謝應(yīng)助，請繼續(xù)為其他蟲友解答噢！ 2015-11-06 13:55:15
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1）不同的物質(zhì)對應(yīng)最適緩沖液也不一樣，你的問題別人無法給你確定的解答，這個你自己試驗下不就完事了么，事實大于雄辯。 2）用氫氧化鈉的緩沖液，行不行先試驗。多動手。 3）酶反應(yīng)過程控制PH的方式有很多，補堿或補酸，怎么補，看你的實驗條件，反應(yīng)釜自帶PH計，有自動控制流加酸堿的蠕動泵，要么小實驗就把PH開著放進反應(yīng)溶液中，隨時觀察，隨時調(diào)節(jié)。 4）當然需要一直攪拌。哎，小朋友多試驗。祝順利。 |
2樓2015-11-05 09:17:49
3樓2015-11-05 13:17:33
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4樓2015-11-05 15:05:20
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5樓2015-11-06 16:53:35
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不用緩沖液，酶解之后不也得除鹽么？而且即使用緩沖液，酶解過程pH也會發(fā)生變化的。我現(xiàn)在用透析的方法除鹽，每次處理的量好少啊 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2015-11-06 20:38:51
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