 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1544 | 回復(fù): 9 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿(mǎn)足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話(huà)題的所有回帖 | |||
[求助]
緊急求助~PCR產(chǎn)物電泳條帶，特別奇怪，LZ好崩潰，，跪求各位提供幫助 已有2人參與
|
|||
|
各位好~~小妹新手在此求助 打算做qPCR標(biāo)準(zhǔn)品，現(xiàn)在用qPCR引物做普通PCR，擴(kuò)增條件95℃8min，（95℃ 30s /55℃ 30S / 72℃ 30S ）35個(gè)循環(huán)，72 10min，體系takra premix Taq（Ex taq verson 2.0）10u /正反引物（10mM）各1u/模版1u，電泳條帶有兩條，還算清晰，但并不是目的條帶，其實(shí)目的條帶只有100多bp, 條帶居然有1000多bp,提高退火溫度到60℃，條帶也是這樣的，空白對(duì)照除了引物并沒(méi)有其它條帶，請(qǐng)各位幫忙分析下原因，有沒(méi)有人遇到這種情況？ 還有一開(kāi)始以為是引物合成錯(cuò)了，重新合成了一份，條帶依然是這樣的，我實(shí)在沒(méi)轍了，，引物是采用文獻(xiàn)里面的，很多外文文獻(xiàn)都用過(guò)。。。。我的模版DNA是海水全基因組DNA 附電泳圖 marker是DL2000 圖1 膠孔依次是marker/sample1/blank 圖2 膠孔依次是marker/sample1/sample2 圖片1.jpg 圖片2.jpg |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有213人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線(xiàn)
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
我愛(ài)羅的風(fēng)沙
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 31.5
- 帖子: 20
- 在線(xiàn): 3.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 3362175
- 注冊(cè): 2014-08-11
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀(guān)遺傳學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門(mén)吹雪170: 金幣+3, 鼓 2015-11-11 22:58:02
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門(mén)吹雪170: 金幣+3, 鼓 2015-11-11 22:58:02
| 樓主你好。你看你從基因組里面P出了很多條帶，但是沒(méi)有目的條帶，這說(shuō)明了一個(gè)事實(shí)：你設(shè)計(jì)的引物的特異性不夠好，所以才能P出非特異性的條帶。目的條帶沒(méi)有P出來(lái)，可能是因?yàn)椋孩偻嘶饻囟炔徽_，雖然說(shuō)是要TM減5-10度，但是具體溫度需要自己摸索，建議拉一個(gè)溫度梯度。②樓主之后72度 10分鐘我認(rèn)為這是不正確的，可以嘗試循環(huán)后保持4度或者直接取出產(chǎn)物。 |
4樓2015-11-11 22:18:23
zhangjingwjs
新蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 7.8
- 散金: 240
- 紅花: 6
- 帖子: 123
- 在線(xiàn): 49.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2058795
- 注冊(cè): 2012-10-13
- 專(zhuān)業(yè): 文化社會(huì)學(xué)
|
你確定Dna模版沒(méi)有被污染嗎，怎么感覺(jué)被細(xì)菌DNA污染了呢，所以才會(huì)有1000多的條帶 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶(hù)端 |
2樓2015-11-11 20:42:02
3樓2015-11-11 20:45:29
zhangjingwjs
新蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 7.8
- 散金: 240
- 紅花: 6
- 帖子: 123
- 在線(xiàn): 49.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2058795
- 注冊(cè): 2012-10-13
- 專(zhuān)業(yè): 文化社會(huì)學(xué)
5樓2015-11-11 23:47:18
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 083000學(xué)碩274求調(diào)劑 +5 | Li李魚(yú) 2026-03-26 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 070300化學(xué)求調(diào)劑 +4 | 起個(gè)名咋這么難 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑11408 +3 | 劉小鹿lu 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 學(xué)碩274求調(diào)劑 +5 | Li李魚(yú) 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 277跪求調(diào)劑 +5 | 1915668 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 070300求調(diào)劑306分 +3 | 26要上岸 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +8 | 超級(jí)伊昂大王 2026-03-24 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +7 | 邱gl 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +6 | 墨墨漠 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703一志愿9，初試成績(jī)：338，四六級(jí)已過(guò)，有科研經(jīng)歷，求調(diào)劑！ +3 | Zuhui0306 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +5 | 十閑wx 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué)材料與化工 264分各科過(guò)A區(qū)國(guó)家線(xiàn) +10 | 哈哈157349 2026-03-21 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 +5 | .m.. 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +4 | 求求了收下我吧?/a> 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 資源與環(huán)境 調(diào)劑申請(qǐng)(333分) +9 | holy J 2026-03-21 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑 +6 | Koxui 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 【2026考研調(diào)劑】制藥工程 284分 求相關(guān)專(zhuān)業(yè)調(diào)劑名額 +4 | 袁奐奐 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 研研，接電話(huà) 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 269求調(diào)劑 +4 | 我想讀研11 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 一志愿070300浙大化學(xué)358分，求調(diào)劑！
+4
|
酥酥魚(yú).. 2026-03-21 | 4/200 |
|