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[求助]
菌液測序結(jié)果全是非單克隆，求助分析 已有2人參與
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最近同時做了兩個植物內(nèi)生真菌基因庫的TA克�。ê喎QM和N吧），用的18t載，藍(lán)白斑篩選后，后送公司測序。 第一天M送了十幾個樣，除了部分公司說沒有培養(yǎng)成功，無法提取質(zhì)粒外，其他的基本都測序成功，且測出來的目的基因序列沒有問題。 第二天N送了15個樣，公司說5個培養(yǎng)失敗，2個測序失敗，7個非單克隆，1個測序成功，但是這個測序成功的序列我去載體后的基因序列壓根不是我想要的。 然后我對7個非單克隆的序列嘗試去載體，有幾個序列能找到插入點前端序列，但是找不到插入點后端序列；還有的插入點前后端序列都找不到；還有的前后端序列都能找到，但插入的序列不是目的序列。 同一批的處理，出現(xiàn)這種結(jié)果，不是很理解，我在送樣前每個都隨機(jī)篩選了七八個樣，跑了菌液pcr，看了條帶，都沒有問題。本人小白，也是剛剛接觸克隆測序?qū)嶒�，還請大家多多指教。 以下為幾張測序顯示非單克隆的峰圖： 截圖00.jpg 截圖01.jpg 截圖02.jpg |
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