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音軌銅蟲 (著名寫手)
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[求助]
熒光分光光度計(jì)使用的一些問題 已有3人參與
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我掃的是硫化鎘，按理來說應(yīng)該有熒光吸收的，但是不太會(huì)操作，好像沒掃出有用的圖。 1.我去查了下分析化學(xué)書，書上有這么一段話是說拉曼光會(huì)對(duì)待測(cè)物熒光吸收有干擾，通過掃空白溶液找到合適的激發(fā)光波長。不太懂什么意思。 http:// ![\"熒光分光光度計(jì)使用的一些問題\"](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2015/1123/bw134h2970304_1448247689_783.jpg#opennewwindow\") http:// ![\"熒光分光光度計(jì)使用的一些問題-1\"](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2015/1123/bw134h2970304_1448247690_615.jpg#opennewwindow\") 2.我掃的是發(fā)射圖譜（激發(fā)波長固定），之前隔壁老師告訴我待測(cè)物的紫外最大吸收波長（待測(cè)物紫外最大吸收波長在233~235nm）不一定與它最合適的發(fā)射波長相符，有些物質(zhì)沒有紫外吸收但是有熒光吸收，按理說硫化鎘是有光致發(fā)光特性的，應(yīng)該掃得出來峰啊...... 師哥告訴我設(shè)定的時(shí)候“發(fā)射終止波長”不要超過“激發(fā)波長”的2倍，還有“激發(fā)波長”應(yīng)比“發(fā)射起始波長小”10~20nm，后一個(gè)無非是不想看到激發(fā)波長那個(gè)尖銳的峰我覺得這個(gè)無所謂，前一個(gè)我不知道這么設(shè)置有什么必要。 http:// ![\"熒光分光光度計(jì)使用的一些問題-2\"](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2015/1123/bw134h2970304_1448247689_177.jpg#opennewwindow\") 3.這是激發(fā)波長為250nm時(shí)候得到的圖譜，由于發(fā)射終止波長設(shè)定在480nm，所以只看到一個(gè)上升趨勢(shì)，我覺得它應(yīng)該是個(gè)峰吧。 http:// ![\"熒光分光光度計(jì)使用的一些問題-3\"](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2015/1123/w133h2970304_1448247688_419.png#opennewwindow\") 我也鬧不清楚到底怎么才能正確的掃出來熒光吸收峰......求萬能的蟲友指點(diǎn)一二。 |
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那我覺得你還是好好看看儀器的說明書，看看激發(fā) 發(fā)射的設(shè)定要求�？梢韵仍O(shè)定個(gè)低波長的激發(fā)，然后掃發(fā)射光譜。然后激發(fā)波長遞增，再繼續(xù)掃發(fā)射光譜。之后大概能得到一個(gè)最佳發(fā)射波長，在這個(gè)發(fā)射波長下，再反過來驗(yàn)證激發(fā)波長。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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音軌7樓2015-11-23 22:13:42
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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不知道你用的什么儀器，要確定最佳激發(fā)和發(fā)射光譜，可以掃3D熒光光譜，有的儀器要求發(fā)射波長比激發(fā)波長大20nm，我用過瓦里安的熒光，它在設(shè)置3D熒光掃描時(shí)，沒有激發(fā)和發(fā)射波長的設(shè)定限制，二者可以相等。得到3D光譜后，就可清晰看到最佳ex和em了。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2015-11-23 12:21:30
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4樓2015-11-23 21:48:33
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5樓2015-11-23 21:50:50
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6樓2015-11-23 21:57:01
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我上次就是這么掃的可是并掃不出來，溶劑用的甲醇，應(yīng)該不是溶劑的事，是不是跟發(fā)射終止波長設(shè)得太短有關(guān)系？我明天再去試試吧，總之，謝謝你。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
8樓2015-11-23 22:35:57
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10樓2015-11-23 22:38:47
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