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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 化學化工區(qū) » 分析 » 光譜分析 » 熒光分光光度計使用的一些問題
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音軌銅蟲 (著名寫手)
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[求助]
熒光分光光度計使用的一些問題 已有3人參與
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我掃的是硫化鎘，按理來說應該有熒光吸收的，但是不太會操作，好像沒掃出有用的圖。 1.我去查了下分析化學書，書上有這么一段話是說拉曼光會對待測物熒光吸收有干擾，通過掃空白溶液找到合適的激發(fā)光波長。不太懂什么意思。 http:// ![\"熒光分光光度計使用的一些問題\"](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2015/1123/bw134h2970304_1448247689_783.jpg#opennewwindow\") http:// ![\"熒光分光光度計使用的一些問題-1\"](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2015/1123/bw134h2970304_1448247690_615.jpg#opennewwindow\") 2.我掃的是發(fā)射圖譜（激發(fā)波長固定），之前隔壁老師告訴我待測物的紫外最大吸收波長（待測物紫外最大吸收波長在233~235nm）不一定與它最合適的發(fā)射波長相符，有些物質沒有紫外吸收但是有熒光吸收，按理說硫化鎘是有光致發(fā)光特性的，應該掃得出來峰啊...... 師哥告訴我設定的時候“發(fā)射終止波長”不要超過“激發(fā)波長”的2倍，還有“激發(fā)波長”應比“發(fā)射起始波長小”10~20nm，后一個無非是不想看到激發(fā)波長那個尖銳的峰我覺得這個無所謂，前一個我不知道這么設置有什么必要。 http:// ![\"熒光分光光度計使用的一些問題-2\"](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2015/1123/bw134h2970304_1448247689_177.jpg#opennewwindow\") 3.這是激發(fā)波長為250nm時候得到的圖譜，由于發(fā)射終止波長設定在480nm，所以只看到一個上升趨勢，我覺得它應該是個峰吧。 http:// ![\"熒光分光光度計使用的一些問題-3\"](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2015/1123/w133h2970304_1448247688_419.png#opennewwindow\") 我也鬧不清楚到底怎么才能正確的掃出來熒光吸收峰......求萬能的蟲友指點一二。 |
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【答案】應助回帖
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那我覺得你還是好好看看儀器的說明書，看看激發(fā) 發(fā)射的設定要求�？梢韵仍O定個低波長的激發(fā)，然后掃發(fā)射光譜。然后激發(fā)波長遞增，再繼續(xù)掃發(fā)射光譜。之后大概能得到一個最佳發(fā)射波長，在這個發(fā)射波長下，再反過來驗證激發(fā)波長。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
音軌7樓2015-11-23 22:13:42
音軌
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2樓2015-11-23 11:13:46
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【答案】應助回帖
感謝參與，應助指數(shù) +1
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不知道你用的什么儀器，要確定最佳激發(fā)和發(fā)射光譜，可以掃3D熒光光譜，有的儀器要求發(fā)射波長比激發(fā)波長大20nm，我用過瓦里安的熒光，它在設置3D熒光掃描時，沒有激發(fā)和發(fā)射波長的設定限制，二者可以相等。得到3D光譜后，就可清晰看到最佳ex和em了。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2015-11-23 12:21:30
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4樓2015-11-23 21:48:33
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