 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4567 | 回復(fù): 9 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
yangqian_517新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
用植物cDNA擴(kuò)增一個(gè)1700bp左右的全長(zhǎng)序列，一直擴(kuò)不出來(lái)，求助原因 已有4人參與
|
||
| 補(bǔ)充：1、引物是根據(jù)已有的cDNA序列設(shè)計(jì)的；2、同樣的引物用基因組DNA做模板就能擴(kuò)增出來(lái)；3、cDNA是反轉(zhuǎn)錄之后馬上就做PCR的，同時(shí)還用熒光定量的引物擴(kuò)增了一段200bp的小片段，200bp的片段能擴(kuò)增出來(lái)，但是全長(zhǎng)一直擴(kuò)不出來(lái)。求助有經(jīng)驗(yàn)的同學(xué)給分析一下 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有195人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
yangqian_517: 金幣+5, ★有幫助 2015-11-25 18:23:15
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
yangqian_517: 金幣+5, ★有幫助 2015-11-25 18:23:15
|
基因組DNA和cDNA不一樣，你把退火溫度降一下，你用的是擴(kuò)增長(zhǎng)片段的酶嗎？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
4樓2015-11-25 13:16:12
匿名
用戶注銷(xiāo) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 19 (小學(xué)生)
- 金幣: 775.7
- 散金: 10
- 紅花: 1
- 帖子: 314
- 在線: 41.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 0
- 注冊(cè): 2014-12-26
- 專業(yè): 腫瘤復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移
2樓2015-11-24 20:09:31
東樂(lè)樂(lè)
金蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 1083
- 帖子: 50
- 在線: 29.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 3562569
- 注冊(cè): 2014-11-27
- 專業(yè): 流行病學(xué)方法與衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
yangqian_517: 金幣+5, ★有幫助 2015-11-25 18:22:58
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
yangqian_517: 金幣+5, ★有幫助 2015-11-25 18:22:58
|
我之前一直也是擴(kuò)不出來(lái)，這兩天剛剛有點(diǎn)成績(jī)。我問(wèn)過(guò)生物公司的技術(shù)人員，也在論壇求助過(guò)，他們說(shuō)可能是因?yàn)槟孓D(zhuǎn)錄不完全，有一部分的鏈沒(méi)有打開(kāi)，你可以換個(gè)好一點(diǎn)的逆轉(zhuǎn)錄試劑盒，或者你可以試試用分段克隆的方法分別設(shè)計(jì)引物，克隆出幾段，然后連接起來(lái)。有說(shuō)用重疊延伸pcr方法連接幾個(gè)片段的，但我用的是論壇求助時(shí)他們告訴我的方法，就是在你的目的序列里找到幾個(gè)酶切位點(diǎn)，在酶切位點(diǎn)處設(shè)計(jì)引物，分別擴(kuò)增出幾個(gè)片段，酶切并膠回收后進(jìn)行粘性末端連接，連完再以這個(gè)為模板，用全序列的引物進(jìn)行pcr。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
3樓2015-11-24 21:28:39
yangqian_517
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 643
- 帖子: 6
- 在線: 4.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2845389
- 注冊(cè): 2013-12-03
- 專業(yè): 植物化學(xué)保護(hù)
5樓2015-11-25 18:21:04
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +4 | AZMK 2026-03-27 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 315分求調(diào)劑 +6 | 26考研上岸版26 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +7 | 新時(shí)代材料 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0856調(diào)劑 +5 | 求求讓我有書(shū)讀?/a> 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分調(diào)劑 +4 | 大饞小子 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0856，材料與化工321分求調(diào)劑 +4 | 大饞小子 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | question挽風(fēng) 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)338求調(diào)劑！ +6 | Zuhui0306 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +6 | Ymlll 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院-光纖傳感課題組招生-中國(guó)科學(xué)院大學(xué)、深圳理工大學(xué)聯(lián)培 +5 | YangTyu1 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 22 350 本科985求調(diào)劑，求老登收留 +4 | 李軼男003 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料科學(xué)與工程 317求調(diào)劑 +4 | JKSOIID 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求b區(qū)院校調(diào)劑 +4 | 周56 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料專碩331求調(diào)劑 +4 | 鮮當(dāng)牛 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 085404電子信息284分求調(diào)劑
+4
|
13659058978 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 361求調(diào)劑 +3 | Glack 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 315分，誠(chéng)求調(diào)劑，材料與化工085600 +3 | 13756423260 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿海大，0703化學(xué)學(xué)碩304分，有大創(chuàng)項(xiàng)目，四級(jí)已過(guò) +6 | 幸運(yùn)哩哩 2026-03-22 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)調(diào)劑 +5 | Surekei 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 330求調(diào)劑0854 +3 | assdll 2026-03-21 | 3/150 |
|