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letliufly金蟲 (小有名氣)
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[求助]
為什么標(biāo)記在DNA的亞甲基藍(lán)的電化學(xué)信號(hào)不斷降低?謝謝大家了! 已有2人參與
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| 傳統(tǒng)電化學(xué)生物傳感,利用標(biāo)記在DNA上的亞甲基藍(lán)作為電信號(hào)分子(DNA另外一端標(biāo)記有巰基用于修飾在金電極上)。 原理中,應(yīng)該目標(biāo)物出現(xiàn),亞甲基信號(hào)升高。但是,當(dāng)加入目標(biāo)DNA的時(shí)候,亞甲基藍(lán)信號(hào)卻降低了好幾倍。請問這是什么原因???(DNA雜交是在HEPES溶液里面。電信號(hào)掃描是在Tris-HCl溶液里,pH=7.4) |

金蟲 (小有名氣)

鐵桿木蟲 (著名寫手)
專家顧問 (著名寫手)
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專家經(jīng)驗(yàn): +513 |
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你的信號(hào)分子是先修飾到電極上的是吧,是假定沒上去目標(biāo)DNA的時(shí)候是遠(yuǎn)離電極表面的,然后設(shè)計(jì)目標(biāo)DNA上去后拉近電極表面的原理嗎? 這個(gè)方法有些問題,因?yàn)閱捂淒NA不是剛性的,有可能開始的時(shí)候信號(hào)分子就接近表面了。還要一個(gè)問題是有可能上去的目標(biāo)DNA多了也會(huì)一定程度阻礙電極表面電荷傳遞。 后來別人改進(jìn)的就是用個(gè)稍微長點(diǎn)的鏈,開始假設(shè)是接近表面的,然后目標(biāo)上去后雙鏈有一定剛性,拉直了后信號(hào)分子遠(yuǎn)離,這個(gè)稍微好一點(diǎn)。 當(dāng)然了剛開始做有個(gè)問題是如果有部分信號(hào)分子是吸附上去的,在雜交的過程中脫落也是有可能的。 |
金蟲 (小有名氣)

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