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[求助]
想要透析純化一個蛋白，求有經(jīng)驗的大神來教教小弟 已有3人參與
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目前大概200ml經(jīng)過超聲破碎細胞獲得的粗酶液，看到文獻中有用透析的方法進行純化蛋白的。但是從來沒有做過，實驗室?guī)熜謳熃阋矝]做過類似工作。求哪位大神有比較豐富詳細的操作經(jīng)驗來指導(dǎo)下~~~ |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
o隱形人o: 金幣+10, ★★★很有幫助 2016-03-27 20:22:51
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
o隱形人o: 金幣+10, ★★★很有幫助 2016-03-27 20:22:51
| 透析法純化，效果不是很好，純度也不好，比如你的蛋白50kd的，你選用10kd的膜截留，大于10kd的蛋白就在透析膜里面，小于的雜蛋白就除去了，或者你的蛋白2kd，你就選用10kd的透析膜，目標就在透析液中，大于10kd的雜蛋白就在透析袋中。這個效果不好，還不如分級鹽析啊，就是溶液加不同量的硫酸銨，然后，每個濃度收集沉淀，溶解，看你的目標在那個里面。純度也不高，要高純度的，還是層析比較好，比如疏水的，離子交換的等等，祝順利。 |
2樓2015-12-14 15:02:38
3樓2015-12-15 16:08:16
4樓2015-12-20 12:34:16
5樓2016-03-27 20:24:15
6樓2016-03-27 20:24:52
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