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[求助]
想要透析純化一個蛋白,求有經(jīng)驗的大神來教教小弟 已有3人參與
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目前大概200ml經(jīng)過超聲破碎細胞獲得的粗酶液,看到文獻中有用透析的方法進行純化蛋白的。但是從來沒有做過,實驗室?guī)熜謳熃阋矝]做過類似工作。求哪位大神有比較豐富詳細的操作經(jīng)驗來指導下~~~![]() |
專家顧問 (職業(yè)作家)
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專家經(jīng)驗: +702 |
| 透析法純化,效果不是很好,純度也不好,比如你的蛋白50kd的,你選用10kd的膜截留,大于10kd的蛋白就在透析膜里面,小于的雜蛋白就除去了,或者你的蛋白2kd,你就選用10kd的透析膜,目標就在透析液中,大于10kd的雜蛋白就在透析袋中。這個效果不好,還不如分級鹽析啊,就是溶液加不同量的硫酸銨,然后,每個濃度收集沉淀,溶解,看你的目標在那個里面。純度也不高,要高純度的,還是層析比較好,比如疏水的,離子交換的等等,祝順利。 |

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