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o隱形人o新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
想要透析純化一個(gè)蛋白，求有經(jīng)驗(yàn)的大神來(lái)教教小弟 已有3人參與
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目前大概200ml經(jīng)過(guò)超聲破碎細(xì)胞獲得的粗酶液，看到文獻(xiàn)中有用透析的方法進(jìn)行純化蛋白的。但是從來(lái)沒(méi)有做過(guò)，實(shí)驗(yàn)室?guī)熜謳熃阋矝](méi)做過(guò)類(lèi)似工作。求哪位大神有比較豐富詳細(xì)的操作經(jīng)驗(yàn)來(lái)指導(dǎo)下~~~ |
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乘風(fēng)浮云
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3樓2015-12-15 16:08:16
hc-material
專(zhuān)家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
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專(zhuān)家經(jīng)驗(yàn): +702 - BioEPI: 1
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- 專(zhuān)業(yè): 核技術(shù)及其應(yīng)用
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
o隱形人o: 金幣+10, ★★★很有幫助 2016-03-27 20:22:51
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
o隱形人o: 金幣+10, ★★★很有幫助 2016-03-27 20:22:51
| 透析法純化，效果不是很好，純度也不好，比如你的蛋白50kd的，你選用10kd的膜截留，大于10kd的蛋白就在透析膜里面，小于的雜蛋白就除去了，或者你的蛋白2kd，你就選用10kd的透析膜，目標(biāo)就在透析液中，大于10kd的雜蛋白就在透析袋中。這個(gè)效果不好，還不如分級(jí)鹽析啊，就是溶液加不同量的硫酸銨，然后，每個(gè)濃度收集沉淀，溶解，看你的目標(biāo)在那個(gè)里面。純度也不高，要高純度的，還是層析比較好，比如疏水的，離子交換的等等，祝順利。 |
2樓2015-12-14 15:02:38
4樓2015-12-20 12:34:16
o隱形人o
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
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- 蟲(chóng)號(hào): 3857008
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5樓2016-03-27 20:24:15
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