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凱倫愛(ài)佳佳金蟲 (正式寫手)
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[求助]
熒光定量，ABI的機(jī)子、用的染料，擴(kuò)增曲線和熔解曲線怎么成了這個(gè)樣子 已有2人參與
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前期摸索中，普通PCR溫度梯度60℃。 模板試過(guò)稀釋了5倍和10倍，20ul體系，95℃5min，95℃10s，60℃ 10s，72℃ 15s，40個(gè)循環(huán)。 熒光定量產(chǎn)物電泳條帶為目的條帶，使用過(guò)八連管，染料是羅氏的。 P51212-170027.jpg P51212-171609.jpg P51212-171620.jpg P51214-121552.jpg |
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2樓2015-12-15 09:02:37
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3樓2015-12-15 10:26:47
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4樓2015-12-15 10:31:03
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6樓2015-12-15 10:41:24
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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還有這個(gè)循環(huán)的時(shí)間似乎有點(diǎn)短，我自己做通常退火和延伸時(shí)間在30s~60s 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2015-12-15 10:50:24
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9樓2015-12-15 10:53:35
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10樓2015-12-15 10:54:33
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