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[交流]
一個導致我做了20次PCR也沒找到的問題 已有29人參與
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LZ 在國外訪問，做昆蟲線粒體基因組的。 提完模板之后，擴增最簡單的COX1基因，膠圖如下 之后為了增加樣本量，又提了兩次也還好。后來突然有一次就開始出現(xiàn)拖帶，并且不再出現(xiàn)原條帶。而12S 基因擴增的很好，條帶十分清晰。 為了查明是哪部分原因。 做了很多次PCR，可謂心力交瘁。 1.用了三臺機器，排除機器原因。 2.更換premix，更換水，重新配置引物，無效果。 3.兩種模板均出現(xiàn)此情況 4.作為negative，以水替代DNA的對照也出現(xiàn)同樣的拖帶。 5。12S可以穩(wěn)定擴增。如圖。 今天換了一種新的模板作為對照，更加詭異。拖帶和條帶同時存在，而原模板和水仍然無條帶，僅有拖帶。 我最不理解為什么新?lián)Q的水里也有拖帶，如有高手指教，不勝感激。 對不起我只有4.5個金幣，還不能懸賞。 1.jpg 2.jpg 601800125818983966.jpg |
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3樓2015-12-19 02:03:12
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2016-01-13 22:52:54
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maker沒有拖帶，膠和緩沖液應該是沒有問題的 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2015-12-19 00:51:44
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