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一個(gè)導(dǎo)致我做了20次PCR也沒(méi)找到的問(wèn)題 已有29人參與
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LZ 在國(guó)外訪問(wèn)，做昆蟲(chóng)線粒體基因組的。 提完模板之后，擴(kuò)增最簡(jiǎn)單的COX1基因，膠圖如下 之后為了增加樣本量，又提了兩次也還好。后來(lái)突然有一次就開(kāi)始出現(xiàn)拖帶，并且不再出現(xiàn)原條帶。而12S 基因擴(kuò)增的很好，條帶十分清晰。 為了查明是哪部分原因。 做了很多次PCR，可謂心力交瘁。 1.用了三臺(tái)機(jī)器，排除機(jī)器原因。 2.更換premix，更換水，重新配置引物，無(wú)效果。 3.兩種模板均出現(xiàn)此情況 4.作為negative，以水替代DNA的對(duì)照也出現(xiàn)同樣的拖帶。 5。12S可以穩(wěn)定擴(kuò)增。如圖。 今天換了一種新的模板作為對(duì)照，更加詭異。拖帶和條帶同時(shí)存在，而原模板和水仍然無(wú)條帶，僅有拖帶。 我最不理解為什么新?lián)Q的水里也有拖帶，如有高手指教，不勝感激。 對(duì)不起我只有4.5個(gè)金幣，還不能懸賞。 1.jpg 2.jpg 601800125818983966.jpg |
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西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-01-13 22:52:40
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 本帖僅樓主可見(jiàn) |
3樓2015-12-19 02:03:12
glove94
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西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-01-13 22:52:54
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西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-01-13 22:52:54
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maker沒(méi)有拖帶，膠和緩沖液應(yīng)該是沒(méi)有問(wèn)題的 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
2樓2015-12-19 00:51:44
4樓2015-12-19 18:39:43
5樓2015-12-19 18:40:49
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