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tuhangul622金蟲 (小有名氣)
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[求助]
淀粉酶的分離純化 已有2人參與
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| 大俠們好！哪位大俠做過淀粉酶分離純化方面的研究？我現(xiàn)在在分離純化一種耐高溫的淀粉酶，通過測酶活，跑活性電泳已經(jīng)確定了這個(gè)酶的存在，但是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)濃度太低，跑蛋白質(zhì)電泳沒有跑出來，甚至只有暗暗地條帶，沒有辦法看清楚，這還是我濃縮以后的結(jié)果，這種情況下若用常規(guī)的離子交換層析法，那我的樣品會(huì)更加稀釋，得到的量就更小了，請(qǐng)問，誰能建議更好的分離純化方法，謝謝 |
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tuhangul622
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你好，這個(gè)主要是要看水解產(chǎn)物，你要先測水解產(chǎn)物是葡萄糖還是麥芽糖還是糊精，才能確定你這個(gè)酶是哪一種淀粉酶 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2016-02-19 00:36:44
hc-material
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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既然目標(biāo)耐高溫，那就就先80度水浴30分鐘，讓雜蛋白變性，然后離心或過濾，然后硫酸氨鹽析，然后將鹽析的沉淀溶解過疏水層析，或者先煮，在利益交換，在超濾濃縮，或者先濃縮，在煮，在離心，在層析，方式多的去了，不要想，要多試多做，祝順利 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2016-01-09 02:46:37
maomaochongk
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3樓2016-01-17 15:46:59
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我的情況跟你一樣，有水解圈但是蛋白電泳沒有條帶，濃縮后也沒有，硫酸銨沉淀也沒有，然后我提高了膠濃度至18%，有很暗的條帶，不知道怎么做了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-01-18 09:24:58
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