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蒼蠅小田七銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
pcr電泳后，切膠回收，回收的目的條帶上邊總有一條雜帶，求大神指教 已有2人參與
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pcr電泳后，使用的是大空的瓊脂糖凝膠，上樣量為25微升，4個(gè)空，點(diǎn)用后條帶清晰，有一個(gè)距離目的條帶較遠(yuǎn)的雜帶，然后切膠回收，切膠時(shí)切膠完好，沒有帶入雜帶，回收使用的是寶生物的盒子，但回收后再進(jìn)行電泳檢驗(yàn)是否回收到目的條帶時(shí)，在目的條帶上邊總有一條雜帶，求大神指教。 2015-12-31.jpg 這個(gè)maker沒了是點(diǎn)錯(cuò)了 點(diǎn)成buffer了。。。。但是可以看見比較亮的是目的條帶，暗的是雜帶。 2015-12-31回收后跑膠.jpg |
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- 點(diǎn)突變pcr后跑瓊脂糖凝膠電泳發(fā)現(xiàn)條帶不對，請高手指點(diǎn)�。�！
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- PCR產(chǎn)物凝膠回收、酶切等問題請教
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heianduck
金蟲 (正式寫手)
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3樓2016-01-07 08:03:21
xufengnbu
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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重復(fù)一次實(shí)驗(yàn)看看。pcr可以適當(dāng)提高下退火溫度，縮短延伸時(shí)間。切膠時(shí)候注意不要污染 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2016-01-06 23:40:04
蒼蠅小田七
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4樓2016-01-07 08:30:12
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5樓2016-01-07 08:32:00
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