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紫萸香慢001新蟲 (小有名氣)
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[交流]
求教求教:Taq酶作用？？？有沒有人告訴我
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Taq酶有沒有逆轉(zhuǎn)錄酶的作用，比如我拿mRNA加入Taq酶，最終能合成cDNA嗎。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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樓主，看完你的描述，我的結(jié)論是，有百分之九十九可能性，你的mRNA中有DNA污染。 買個好一點的DNase I, 加到mRNA中，按照說明書指導(dǎo)的條件，徹底消化掉DNA，之后再擴增看看，還有沒有條帶。 至于taq酶有沒有反轉(zhuǎn)錄活性，你如果有興趣的話，可以換個其他的pcr高保真酶，替代掉taq酶，看看是不是仍舊能p出東西，依舊能擴增出條帶的話，那是不是更加證明了DNA的污染？ 補一句，你說的文獻(xiàn)報道的taq酶的反轉(zhuǎn)錄活性，是在什么樣的條件下？ [ 發(fā)自手機版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
15樓2016-01-17 18:46:33
南有喬木張愷
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2樓2016-01-16 23:07:31
原來，是這樣
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沒有用的。。。去買個反轉(zhuǎn)錄試劑盒，反轉(zhuǎn)錄cDNA不僅僅需要逆轉(zhuǎn)錄酶，還需要在反轉(zhuǎn)錄之前消化一下你提取的RNA里面的DNA，這樣弄出來的cDNA質(zhì)量才高。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2016-01-16 23:11:30
xiangyingliu
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4樓2016-01-16 23:13:50
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