呂木木

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[交流] 設(shè)計(jì)SYBR熒光引物

跑熒光跑了一個多月了，快放假了還沒有跑出來，引物設(shè)計(jì)一直特異性不高，怎么辦啊，哪位大神幫設(shè)計(jì)一下，引物序列： ATGAAGAGAGATCACCGGGATACCTGCACGGATCAAAATGGTTCCAAGGGCGAATACTCGTCGTCCTCATCCTCAGTGCTGAATGGCAAGGCCAAAATTTGGGGACAAGACCAAGATGGCTGCGGCGGCAGTGGCGGCGGCGGCGGCGGCATGGATGAGTTGCTCGCCGTTTTGGGTTACAAGGTTCGGGCCTCAGACATGGCCGAGGTGGCGGAGAAGCTCGAGCAGCTGGAGATGGTCATGGGCTCTGCTCAGGAAGATGGGATTTCTCAGCTTTCTGATACAGTCCACTACAACCCATCTGATCTCTCCGGCTGGGTTCAGAGCATGCTCTCTGAGTTCAACACGGTTGACGGGTCAGCAATCGACGACCCACTTTTTGTTGCAGCTGGTTCTTCCTCAATCACCTCCATACATTTCTCCAATTCTCACCAGATTGAAAACCCAGCATCTCGGGTTTTCCACGACGATTCGGAATACGATCTCAGAGCAATTCCTGGCGTTGCGGCTTACCCACAAACCCATTTGGACTCGGAGGCTGAGAGCAGGAGAAAGCGATTGAAAACCGCAATTGGGTCCAATTCAATCGGGTCGAATTCCGGGGTTGGAGCCGACTCGGATTCTGTATCGGACCCAGCTCGGCCTCTGGTCCTGGTTGACTCACAAGAAACAGGCGTTAGACTCGTCCATACACTCGTGGCTTGTGCTGAGGCTGTTCAGCAAGAGAACCTGAAGCTCGCAGACGCGCTAGTGAAGCACGTGGGTCTACTCGCGGCCTCCCAAGCCGGCGCTATGAGAAAAGTCGCCACTTACTTTGCCGAAGCTCTGGCTCGTCGAATTTACCGAATTTACCCTCAGGACAGTCTGGATTCTTCATATTCAGATATTCTCCAGATGCACTTTTACGAGACCTGCCCCTATCTCAAGTTTGCTCACTTCACCGCAAACCAGGCCATTCTCGAAGCCTTTGCCACGGCAAGTAGAGTCCACGTCATTGATTTTGGGCTTAAGCAGGGGATGCAATGGCCAGCGCTCATGCAGGCCCTAGCATTGAGGCCCGGCGGGCCGCCCGCGTTTCGGCTTACAGGAATTGGCCCGCCGCAGCCCGACAACACGGACGCCTTGCAGCAGGTGGGATGGAAGCTGGCCCAATTGGCCGAAACTATTGGCGTAGAGTTTGAATTTCGGGGATTCGTCGCAAATAGTTTGGCAGATCTCGAACCCTCGATGCTCGAGATCCGCCCTCCAGATGTCGAGACAGTGGCGGTGAACTCGTGTTTTGAGCTCCACCCTCTCCTGGCTCGACCCGGGGCGGTTGAAAAGGTCTTGTCATCAATCAAGGCTATGAAGCCTAAGATTGTGACAATTGTGGAGCAGGAGGCAAACCATAATGGACCGATTTTCCTGGACCGGTTCAACGAGGCCTTGCATTATTACTCCAACTTGTTTGACTCGCTGGAGGGATCGTCCGGTCCGAGTCAGGATTTGGTCATGTCCGAGGTGTACTTGGGTCGACAGATATGCAACGTGGTAGCATGTGAAGGTCAGGACCGAGTCGAGCGACACGAGACTCTGACTCAGTGGCGAGGTCGGATGGACTCGGCCGGGTTCGACCTGGTTCACCTCGGGTCGAACGCGTTCAAGCAGGCCAGTATGTTGCTGGCTCTTTTCGCCGGCGGAGATGGGTACAGGGTGGAGGAGAACAATGGGTCTCTCATGCTTGGGTGGCACACACGGCCCCTCATAGCCACCTCAGCATGGCAGCTGGCGAGTTCGACTGAGTCAACCCGGTGA

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1樓 2016-01-19 13:31:08

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lifechuteng

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請問您的物種是什么？我來給您設(shè)計(jì)

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2樓2016-01-19 14:13:46

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lifechuteng

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Prunus mume DELLA mRNA是這個嗎？
PREDICTED: Prunus mume DELLA protein GAI (LOC103328576), mRNA

product length = 113
Forward primer  1 AGCAATCGACGACCCACTTT  20
Template       637  ....................  656

Reverse primer  1 AATCGTCGTGGAAAACCCGA  20
Template       749  ....................  730

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3樓2016-01-19 14:20:13

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納米之心

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火星人要回火星了！��！

4樓2016-01-19 14:26:57

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美億美生物

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技術(shù)服務(wù)-實(shí)驗(yàn)代做

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5樓2016-01-19 14:37:47

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hnnh123

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熒光引物設(shè)計(jì)需要所檢測物種的同源基因同時(shí)建庫以提高特異性的吧，只有目的序列應(yīng)該不行的。

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6樓2016-01-19 16:54:34

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呂木木

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引用回帖:

3樓: Originally posted by lifechuteng at 2016-01-19 14:20:13
Prunus mume DELLA mRNA是這個嗎？
PREDICTED: Prunus mume DELLA protein GAI (LOC103328576), mRNA

product length = 113
Forward primer 1 AGCAATCGACGACCCACTTT 20
Template 637 .......... ...

是的

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7樓2016-01-20 20:01:14

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好像你設(shè)計(jì)的這個不錯唉，我試試，謝啦

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8樓2016-01-20 20:07:57

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引用回帖:

但似乎是的三個以上相同堿基太多，會不會產(chǎn)生錯配啥的

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9樓2016-01-20 20:09:47

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引用回帖:

4樓: Originally posted by 納米之心 at 2016-01-19 14:26:57
祝福樓主

謝謝

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10樓2016-01-20 23:37:14

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