 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1348 | 回復(fù): 4 | ||
[求助]
半定量PCR 已有3人參與
|
|
在做半定量PCR，是應(yīng)該先用內(nèi)參調(diào)cdna濃度吧，我都稀釋了100倍了，有的還亮的不得了，我的循環(huán)數(shù)是30。同學(xué)建議可以用28循環(huán)試試，那這樣會不會影響后期平臺期的查找阿。不過，這個應(yīng)該先找平臺期確定循環(huán)參數(shù)呢還是要先用內(nèi)參調(diào)濃度阿…… 各位大神求指點阿 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有290人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
小小ni和柯爾
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 48.6
- 帖子: 11
- 在線: 5.1小時
- 蟲號: 4435697
- 注冊: 2016-02-25
- 性別: MM
- 專業(yè): 畜牧學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
西門吹雪170: 金幣+4, 鼓勵回帖交流 2016-02-25 22:39:12
西門吹雪170: 金幣+4, 鼓勵回帖交流 2016-02-25 22:39:12
|
一般的目的基因我們設(shè)定它們的最佳循環(huán)數(shù)在25到35之間。因此，我認(rèn)為，您可以先用25循環(huán)試一次，若依舊很亮，就調(diào)節(jié)DNA濃度，直至最佳循環(huán)數(shù)處于25至35之間。 置于稀釋濃度，有兩點建議：1 可在反轉(zhuǎn)DNA前對RNA的濃度進(jìn)行控制，我們實驗室采用1ugRNA對應(yīng)20倍ul的體系。2 無需在乎稀釋倍數(shù)，只要最后保證每組DNA的濃度相等即可 建議采用第一種 對于最佳循環(huán)數(shù)的測定：配相同PCR轉(zhuǎn)體系6管，循環(huán)數(shù)分別為25，27,29,31，33,35 其余條件全部相同，在同一塊膠上 一起跑膠。照膠時會發(fā)現(xiàn)條帶有一個逐漸增量至不再增量的過程（即既是循環(huán)數(shù)增加，但條帶亮度是一樣的），這個亮度就是平臺期，此時我們?nèi)×炼葎倓偝霈F(xiàn)的條帶，然后為確保每次都有條帶出現(xiàn)，正式試驗時在這個循環(huán)數(shù)上加2即可。 |
2樓2016-02-25 19:57:59
3樓2016-02-25 20:09:24
4樓2016-02-28 16:32:36
你是路人甲
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 232
- 散金: 42
- 帖子: 191
- 在線: 24.8小時
- 蟲號: 13104654
- 注冊: 2018-12-09
- 專業(yè): 微生物遺傳育種學(xué)
5樓2019-01-31 10:40:42
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 小小不點愛 的主題更新
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 330一志愿中國海洋大學(xué) 化學(xué)工程 085602 有讀博意愿 求調(diào)劑 +3 | wywy.. 2026-03-27 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 277跪求調(diào)劑 +5 | 1915668 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 266分求材料化工冶金礦業(yè)等專業(yè)的調(diào)劑 +4 | 哇呼哼呼哼 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +6 | 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 劉柯@ 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 314求調(diào)劑 +3 | 溪云珂 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大085600，310分求調(diào)劑 +5 | 李瀟可 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉大071010，316分求調(diào)劑 +3 | xgbiknn 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +4 | 崔wj 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 304材料求調(diào)劑
+4
|
鐘llll 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 一志愿 本科 北科大 化學(xué) 343 +6 | 13831862839 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +6 | wasdssaa 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +8 | Auroracx 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué) 296 求調(diào)劑 +4 | 朵朵- 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩，一志愿湖南大學(xué)，初試成績338 +4 | YYYYYNNNNN 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院-光纖傳感課題組招生-中國科學(xué)院大學(xué)、深圳理工大學(xué)聯(lián)培 +5 | YangTyu1 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085600 材料與化工 329分求調(diào)劑 +9 | Mr. Z 2026-03-25 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 機械學(xué)碩總分317求調(diào)劑�。。�！ +4 | Acaciad 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 347求調(diào)劑 +4 | L when 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 一志愿070300浙大化學(xué)358分，求調(diào)劑！
+4
|
酥酥魚.. 2026-03-21 | 4/200 |
|