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飄逸的云新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
釀酒酵母破胞問(wèn)題求助 已有4人參與
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本人剛開(kāi)始做釀酒酵母，需要破壁得到胞內(nèi)的蛋白，但是實(shí)驗(yàn)室以前沒(méi)人做過(guò)，所以不知道要怎么操作，請(qǐng)問(wèn)有前輩能否提供一些指導(dǎo)嗎？我試過(guò)用超聲破碎的方法，功率大概為600w左右，破碎之后離心看到了沉淀中有黑色的物質(zhì)生成了，但是不知道破碎效率怎么樣，想請(qǐng)教一下有沒(méi)有人試過(guò)用超聲破碎酵母細(xì)胞的，非常感謝！其他方法，如酸洗玻璃珠法中的玻璃珠能夠重復(fù)利用嗎？ 跪謝各位大俠指點(diǎn)！   |
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朱多龍
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| 木有問(wèn)題的，如果酵母表達(dá)的蛋白不需要活性檢測(cè)什么的，600W木有問(wèn)題的。如果需要后續(xù)的活性檢測(cè)，建議功率適當(dāng)降低 400w可以了。超聲后離心有黑色物質(zhì)也很正常，不用擔(dān)心。至于超聲的時(shí)間，看你超聲的菌液量。一般20-30分鐘就可以了。 |
3樓2014-02-23 18:59:34
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4樓2014-02-23 23:48:02
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5樓2014-02-24 14:40:42
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6樓2014-02-24 15:19:56
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