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devil2006木蟲 (正式寫手)
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[求助]
重組釀酒酵母轉(zhuǎn)化子篩選的問題
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| 最近在做工業(yè)釀酒酵母的基因重組試驗，請問如果沒有篩選標(biāo)記（比如卡納，營養(yǎng)缺陷型等），對醋酸鋰轉(zhuǎn)化后長出的單菌落，利用菌落PCR盲篩，有沒有可能篩選出正確的轉(zhuǎn)化子？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金幣+3): good 2011-08-11 12:02:55
西瓜(金幣+5, MolEPI+1): 很專業(yè) 2011-08-11 12:03:14
devil2006(金幣+3): 謝謝你，真專業(yè)，我再研究研究 2011-08-11 15:21:41
dhd997(金幣+3): good 2011-08-11 12:02:55
西瓜(金幣+5, MolEPI+1): 很專業(yè) 2011-08-11 12:03:14
devil2006(金幣+3): 謝謝你，真專業(yè)，我再研究研究 2011-08-11 15:21:41
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用5-FOA篩尿嘧啶缺陷型，這個是最常用的做法了。 然后依次可以得到多重營養(yǎng)缺陷型。 如果是二倍體的話，可以用產(chǎn)孢子培養(yǎng)基分到單倍體，分別做缺陷型后實現(xiàn)特定的基因操作再mate。 這個是很常規(guī)的釀酒酵母操作方法。 |
8樓2011-08-11 08:53:43
11樓2013-05-23 16:30:08
jinkui960
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10樓2013-03-26 21:02:57
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