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devil2006木蟲 (正式寫手)
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[求助]
重組釀酒酵母轉(zhuǎn)化子篩選的問題
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| 最近在做工業(yè)釀酒酵母的基因重組試驗,請問如果沒有篩選標記(比如卡納,營養(yǎng)缺陷型等),對醋酸鋰轉(zhuǎn)化后長出的單菌落,利用菌落PCR盲篩,有沒有可能篩選出正確的轉(zhuǎn)化子? |
【分子生物】EPI帖 |
木蟲 (正式寫手)
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用5-FOA篩尿嘧啶缺陷型,這個是最常用的做法了。 然后依次可以得到多重營養(yǎng)缺陷型。 如果是二倍體的話,可以用產(chǎn)孢子培養(yǎng)基分到單倍體,分別做缺陷型后實現(xiàn)特定的基因操作再mate。 這個是很常規(guī)的釀酒酵母操作方法。 |
至尊木蟲 (知名作家)
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