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求助�。《唐危�169 bp）PCR擴(kuò)增，用Takara La Taq酶，不出條帶呀。。。。 已有5人參與
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 小白第一次發(fā)帖，各位大神見諒。。。。以前用普通的2×Taq PCR Mix擴(kuò)增，它含的酶是Taq DNA Polymerase，擴(kuò)增條帶是169 bp，當(dāng)時可以出條帶，亮度可以。也送測了的，返回結(jié)果有的位點(diǎn)是雙峰。 因?yàn)樘岬腄NA是混合物，現(xiàn)在想做克隆看看混合物的成分，就換成了Takara的La taq，但是不出條帶了呀。。。引物沒變，PCR條件也沒變。。。。 我的條件是這樣的： （1）94℃ 5min （2）94℃ 30s （3）51 ℃ 30s （4）72℃ 45s （5）（2）-（4）39 （6）72℃ 10min （7）4℃ forever 求各位大神幫幫忙，看看有沒有啥問題啊。。。。   有啥沒說到的，各位大神盡管問。。。。。 |
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張凡云
至尊木蟲 (職業(yè)作家)
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第一點(diǎn)，雙峰的結(jié)果是不是你想要的結(jié)果？不是的話，麻煩你的引物重新設(shè)計，不夠特異性，第二點(diǎn)，你可以用高保真酶就可以啊，La酶是長片段擴(kuò)增用的吧？ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
小胖芙芙7樓2016-03-06 09:07:56
dragonhmw
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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2樓2016-03-06 07:24:03
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3樓2016-03-06 07:43:36
yilberg
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4樓2016-03-06 08:38:41
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