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求助。《唐危169 bp)PCR擴增,用Takara La Taq酶,不出條帶呀。。。。 已有5人參與
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![]() ![]() 小白第一次發(fā)帖,各位大神見諒。。。。以前用普通的2×Taq PCR Mix擴增,它含的酶是Taq DNA Polymerase,擴增條帶是169 bp,當時可以出條帶,亮度可以。也送測了的,返回結(jié)果有的位點是雙峰。 因為提的DNA是混合物,現(xiàn)在想做克隆看看混合物的成分,就換成了Takara的La taq,但是不出條帶了呀。。。引物沒變,PCR條件也沒變。。。。 我的條件是這樣的: (1)94℃ 5min (2)94℃ 30s (3)51 ℃ 30s (4)72℃ 45s (5)(2)-(4)39 (6)72℃ 10min (7)4℃ forever 求各位大神幫幫忙,看看有沒有啥問題啊。。。。 ![]() ![]() ![]() ![]() 有啥沒說到的,各位大神盡管問。。。。。 |
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溶液體系是: LA Taq 0.25微升 pcr buffer 2.5微升 dNTP Mix 2微升 primers 1/1微升 ddH2O 17.25微升 DNA 1微升 對了,LA taq是125U的 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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