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cgjlove專家顧問 (著名寫手)
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多糖分子量測定求助 已有2人參與
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| 實驗室用液相,TSK G4000PWXL 的柱子及RID檢測器測多糖分子量,用葡聚糖標品作為標品,分別用超純水和0.1M的NaCl作為流動相測出來的多糖分子量差了幾十倍,水作為流動相測出來大概為800 kD而NaCl作為流動相測只有40 kD,想問下為什么兩種流動相測得結(jié)果差這么多?哪種流動相測得結(jié)果比較靠譜? |
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這個和你的標品有關(guān)吧,標準品有很多種,選擇文獻推薦的,或者有報道的 標品也是分別做了純水和鹽水么?如果沒做,那推薦你分別測試一下。然后又各自的校正曲線。 如果你分別做了標品校正,查了你這個柱子,有效分子量:1,000-700,000 來源:http://wenku.baidu.com/link?url= ... YLs2Yi0gnkXgBSWjuFC |
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TSK G4000是微弱負電的。如果樣品帶有負電荷,比如酸性多糖,流動相是水的話,那么就存在斥力,那多糖應(yīng)該是比較快出來的,如果流動相是氯化鈉,多了氯離子,這樣情況就比較復雜了,我覺得應(yīng)該會更慢出來。 就拿葡聚糖標品來說,它自身是沒有電荷的,在以水做流動相時,它是不受影響的,比較快出來。氯化鈉做流動相時,就存在離子間的作用力了,就會較慢出來。 所以問你出峰時間,可以比較一下看看是不是這種情況,我也是猜測。所以具體用什么流動相得看柱子性質(zhì),更重要的是樣品性質(zhì)。 |
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