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cgjlove禁蟲
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[求助]
多糖分子量測定求助 已有2人參與
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| 實驗室用液相，TSK G4000PWXL 的柱子及RID檢測器測多糖分子量，用葡聚糖標(biāo)品作為標(biāo)品，分別用超純水和0.1M的NaCl作為流動相測出來的多糖分子量差了幾十倍，水作為流動相測出來大概為800 kD而NaCl作為流動相測只有40 kD，想問下為什么兩種流動相測得結(jié)果差這么多？哪種流動相測得結(jié)果比較靠譜？ |
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zinfly
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這個和你的標(biāo)品有關(guān)吧，標(biāo)準(zhǔn)品有很多種，選擇文獻(xiàn)推薦的，或者有報道的 標(biāo)品也是分別做了純水和鹽水么？如果沒做，那推薦你分別測試一下。然后又各自的校正曲線。 如果你分別做了標(biāo)品校正，查了你這個柱子，有效分子量：1,000-700,000 來源：http://wenku.baidu.com/link?url= ... YLs2Yi0gnkXgBSWjuFC |
3樓2016-03-14 12:11:58
qingxiayuan
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2樓2016-03-14 10:50:24
cgjlove
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4樓2016-03-14 12:31:08
qingxiayuan
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TSK G4000是微弱負(fù)電的。如果樣品帶有負(fù)電荷，比如酸性多糖，流動相是水的話，那么就存在斥力，那多糖應(yīng)該是比較快出來的，如果流動相是氯化鈉，多了氯離子，這樣情況就比較復(fù)雜了，我覺得應(yīng)該會更慢出來。 就拿葡聚糖標(biāo)品來說，它自身是沒有電荷的，在以水做流動相時，它是不受影響的，比較快出來。氯化鈉做流動相時，就存在離子間的作用力了，就會較慢出來。 所以問你出峰時間，可以比較一下看看是不是這種情況，我也是猜測。所以具體用什么流動相得看柱子性質(zhì)，更重要的是樣品性質(zhì)。 |
5樓2016-03-14 15:42:42
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