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多糖分子量測(cè)定求助 已有2人參與
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| 實(shí)驗(yàn)室用液相，TSK G4000PWXL 的柱子及RID檢測(cè)器測(cè)多糖分子量，用葡聚糖標(biāo)品作為標(biāo)品，分別用超純水和0.1M的NaCl作為流動(dòng)相測(cè)出來(lái)的多糖分子量差了幾十倍，水作為流動(dòng)相測(cè)出來(lái)大概為800 kD而NaCl作為流動(dòng)相測(cè)只有40 kD，想問(wèn)下為什么兩種流動(dòng)相測(cè)得結(jié)果差這么多？哪種流動(dòng)相測(cè)得結(jié)果比較靠譜？ |
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4樓2016-03-14 12:31:08
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2樓2016-03-14 10:50:24
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這個(gè)和你的標(biāo)品有關(guān)吧，標(biāo)準(zhǔn)品有很多種，選擇文獻(xiàn)推薦的，或者有報(bào)道的 標(biāo)品也是分別做了純水和鹽水么？如果沒(méi)做，那推薦你分別測(cè)試一下。然后又各自的校正曲線(xiàn)。 如果你分別做了標(biāo)品校正，查了你這個(gè)柱子，有效分子量：1,000-700,000 來(lái)源：http://wenku.baidu.com/link?url= ... YLs2Yi0gnkXgBSWjuFC |
3樓2016-03-14 12:11:58
qingxiayuan
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TSK G4000是微弱負(fù)電的。如果樣品帶有負(fù)電荷，比如酸性多糖，流動(dòng)相是水的話(huà)，那么就存在斥力，那多糖應(yīng)該是比較快出來(lái)的，如果流動(dòng)相是氯化鈉，多了氯離子，這樣情況就比較復(fù)雜了，我覺(jué)得應(yīng)該會(huì)更慢出來(lái)。 就拿葡聚糖標(biāo)品來(lái)說(shuō)，它自身是沒(méi)有電荷的，在以水做流動(dòng)相時(shí)，它是不受影響的，比較快出來(lái)。氯化鈉做流動(dòng)相時(shí)，就存在離子間的作用力了，就會(huì)較慢出來(lái)。 所以問(wèn)你出峰時(shí)間，可以比較一下看看是不是這種情況，我也是猜測(cè)。所以具體用什么流動(dòng)相得看柱子性質(zhì)，更重要的是樣品性質(zhì)。 |
5樓2016-03-14 15:42:42
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