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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 生物化學 » 單酶切怎么出現了兩條帶
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[交流]
單酶切怎么出現了兩條帶 已有7人參與
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如題，本人研究生菜鳥，正在構建載體，用的載體是將PUC19改造一下的pEntry，就是在Hind3和Ecor1之間加了一個Not1的酶切位點，目的是串聯表達盒，現將這個pEntry用Not1和Ecor1酶切回收載體連接用H3和E1酶切得到的PUC-Ubi::mBt片段以及自制的Linker（含有Not1酶切位點及Hind3的粘端），之前也用過這個pEntry的載體，上面只有一個Hind3的酶切位點，linker的Hind3粘端與片段上的Hind3連接以后，就把該位點消除，所以連接后應該只有一個Hind3位點，但我最后用Hind3酶切卻出現兩條帶，已經重復好幾次，都是這樣的結果，很崩潰，希望路過的大神幫忙看看！萬分感謝！ 圖中從左到右分別為maker，pEntry-Ubi::mBt被Hind3和Ecor1雙酶切、Hind3單酶切、Ecor1單酶切、Hind3和Not1雙酶切以及質粒的電泳圖，酶沒有被污染。 .jpg.jpg |
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張力民1598
銅蟲 (小有名氣)
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3樓2016-03-23 00:14:39
舒?zhèn)?/a>
金蟲 (小有名氣)
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2016-03-23 07:18:04
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2016-03-23 07:18:04
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很簡單，環(huán)狀載體比線性載體跑的快，切開了不就變線性了嘛，證明載體還沒有完全切完唄 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-03-22 22:25:37
4樓2016-03-23 10:00:30
5樓2016-03-23 10:02:57
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