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妞小胖兒新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助 質(zhì)粒誘導(dǎo)原核表達(dá)總是不成功！ 已有2人參與
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我把已經(jīng)構(gòu)建好的載體轉(zhuǎn)入BL21感受態(tài)里后，加入IPTG誘導(dǎo)原核表達(dá)，然后跑PAGE發(fā)現(xiàn) 無(wú)論上清還是包含體內(nèi)都沒(méi)有想要的蛋白。 目前鑒定過(guò)轉(zhuǎn)入BL21后挑單克隆的菌液，是正確的。也看過(guò)測(cè)序結(jié)果，并沒(méi)有移碼，不知道怎么辦了，求教大神��！畢業(yè)困難 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
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zhyk615
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2樓2016-03-29 09:01:24
bugliuyun
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3樓2016-03-29 16:04:43
4樓2016-03-29 16:16:28
小小細(xì)胞啊
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5樓2016-03-29 19:55:56
| 這個(gè)原因有很多種，我也不想一一分析了，說(shuō)到底還是經(jīng)驗(yàn)不足��！但是結(jié)果就是蛋白不表達(dá)：建議參考資料：原核不表達(dá)或表達(dá)為什么不在上清：7點(diǎn)幾兆的，有點(diǎn)大http://www.detaibio.com/topics/yuan-he-biao-da-faq.html |
6樓2016-03-30 10:19:10
7墨冥7
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7樓2016-03-30 14:49:39
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如果前期的工作都正確�？紤]一下載體的插入位置，是否能正常轉(zhuǎn)錄（有這種情況，標(biāo)記基因表達(dá)了，而目的基因沉默） 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
8樓2016-03-31 23:33:15
9樓2016-04-01 02:38:28
妞小胖兒
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10樓2016-04-02 00:47:44
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