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綠松石6727新蟲 (小有名氣)
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[求助]
BL21大腸桿菌質(zhì)粒提取 已有4人參與
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師兄將pMAL轉(zhuǎn)入了BL21類大腸桿菌中,我用氨芐抗性的培養(yǎng)基搖菌12小時后提質(zhì)粒,濃度只能提到幾十ng,請問表達(dá)蛋白的菌株是不是不適合做質(zhì)粒提? @biostar2009 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
捐助貴賓 (小有名氣)
新蟲 (正式寫手)
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12小時能提到幾十ng已經(jīng)很不錯了。1.培養(yǎng)16-18小時;2.溶液3后,離心上清放在柱子里室溫孵育時間延長;3.酒精洗的時候不洗第二次;4.洗脫時,EB孵育時間延長,可將EB加熱至70度后使用。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
至尊木蟲 (著名寫手)
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可以做3管或4管,每兩三毫升過夜菌液一管,離心所得上清液分批次加到一個吸附柱中,這樣濃度應(yīng)該會多的吧。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |

新蟲 (小有名氣)
木蟲 (小有名氣)
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表達(dá)菌株拷貝量低,而且有背景質(zhì)粒,既bl21自身的質(zhì)粒,非常不建議用表達(dá)菌提質(zhì)粒 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
版主 (著名寫手)

鐵桿木蟲 (著名寫手)
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