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jining1222鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
RIPA裂解后離心提取蛋白液時出現(xiàn)絮狀物 已有1人參與
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| 各位，我使用CST RIPA裂解液裂解懸浮細(xì)胞，每10的6次方個細(xì)胞加20-30ul裂解液，14000g離心后時常出現(xiàn)絮狀沉淀，無法將蛋白液順利吸出。裂解步驟：細(xì)胞離心后加入30ul RIPA，使用移液器混勻，立即凍存于-80℃，次日或一周后取出，冰上融化，每隔十分鐘 渦 旋 振 蕩一次，共進(jìn)行三次，之后4度14000g離心15min。請大家提出寶貴意見，問題到底出在了哪里，謝謝。 |
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2樓2016-07-18 17:43:02
jining1222
鐵蟲 (初入文壇)
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3樓2016-07-18 18:19:22
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4樓2016-07-19 22:53:01
berniehuang
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5樓2016-07-21 10:00:49
柳梢月
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- 專業(yè): 有機(jī)合成
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加完裂解液裂解完后，可以用1ML注射器反復(fù)吹打，這是會有很多泡泡，然后12000轉(zhuǎn)每分鐘離心30分鐘，你再看就會發(fā)現(xiàn)沒有絮狀物啦，另外10的6次方細(xì)胞可以考慮把裂解液加到50微升 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2016-07-24 21:23:12
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