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Yuanfang_818金蟲 (小有名氣)
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[求助]
雙酶切 膠回收 已有5人參與
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質(zhì)粒提取后雙酶切4h，跑膠后，條帶很暗，但是切來(lái)了，膠回收濃度很低，是膠回收的不好嗎，道友指導(dǎo)一下，怎么辦？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-08-01 07:25:31
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用的什么內(nèi)切酶，切這么久？初始質(zhì)粒有多少？MARKER條帶如何？可否給個(gè)圖？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-07-31 22:20:10
Yuanfang_818
金蟲 (小有名氣)
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用的內(nèi)切酶是Sac l和Hind lll，實(shí)驗(yàn)室一般是酶切4h，他們做的也不是很亮。質(zhì)粒，20的體系加1ug，50的體系加1.5ug，好像20的體系要好一些。跑膠后，大片段很亮，我要的小片段不亮。也可能我膠回收的不好，自己覺得膠溶解的時(shí)間有點(diǎn)長(zhǎng)了，其他的應(yīng)該沒啥了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2016-08-01 08:21:44
不愛做實(shí)驗(yàn)
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4樓2016-08-01 11:02:00
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5樓2016-08-02 10:22:12
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快切酶37℃一小時(shí)足矣，慢切酶要比較徹底的話最好過(guò)夜。另外切完直接跑膠條帶很暗的話就不是回收的問(wèn)題了，是開始反應(yīng)的質(zhì)粒量就比較少 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2016-08-03 00:25:23
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9樓2016-08-03 13:21:55
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