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situ000新蟲 (初入文壇)
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[求助]
SDS-PAGE的Marker條帶問題 已有2人參與
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跑了好多次SDS都不好，所以來求助，希望大神幫助 如圖是其中一次，有六個(gè)條帶，其他都還好，就是第一條Marker就是很淡，而且只能隱約看到三條的樣子，但是這個(gè)Marker原本有七個(gè)條帶 后來我換了兩種Marker，也是差不多的情況，就是淡而且跑不全，本來是加5微升，后來加到10,15微升都還是差不多 而且最近我同學(xué)去跑，她說分離膠都一直不凝固，不知道什么問題 FullSizeRender(1).jpg |
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goodluck7111
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kuaile5420: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-10-27 20:56:23
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kuaile5420: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2016-10-27 20:56:23
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已經(jīng)畢業(yè)很多年了 希望我的回答可以幫到你 1.Marker分離不完全可能和配制的分離膠濃度有關(guān)，不同濃度的分離膠，分離范圍是不一樣的，這個(gè)可以在網(wǎng)上查到； 2.確定marker的購買廠家，有些廠家的不是很好，另：請仔細(xì)閱讀marker說明書，上面一般都會(huì)說明分離膠的濃度加樣體積等信息； 3.一般馬克的濃度5微升即可； 4.至于膠不凝固，我記得好像是TEMED的原因，好像這個(gè)玩意是必須放在冰箱而且避光保存，（印象中是這樣，如果有錯(cuò)誤，請指正，莫怪，畢竟已經(jīng)畢業(yè)6年了 哈哈） |
2樓2016-10-26 18:40:21
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7樓2016-10-27 23:32:25
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-10-30 21:50:15
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個(gè)人覺得膠本身應(yīng)該沒有多大問題，應(yīng)該是脫色不完全，背景太高或者是染色液能力不夠~~~至于膠為什么沒凝固，在排除體系問題的前提下，配膠要注意各種試劑所加量的單位，并且要充分混勻~~~祝好運(yùn)~~~ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2016-10-28 00:29:23
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3樓2016-10-26 18:56:12
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4樓2016-10-27 21:02:14
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5樓2016-10-27 21:04:00
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Marker是否室溫長時(shí)間放置的？降解了吧，重新配制，分裝，-20℃保存。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2016-10-27 21:24:16
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邊緣效應(yīng)比較明顯，膠凝固時(shí)不均勻，建議空出第一個(gè)泳道 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2016-10-28 22:38:58
10樓2016-10-30 17:49:50
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