 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 13598 | 回復(fù): 97 | |||
y383514131銀蟲 (小有名氣)
|
[求助]
菌落pcr該怎么做 已有25人參與
|
||
|
最近做菌落pcr總是做不出來，而提基因組或提質(zhì)粒后再進(jìn)行pcr都是可以p出來的，求做菌落pcr注意事項(xiàng)，細(xì)節(jié)，個(gè)人經(jīng)驗(yàn)等 @youlinglyw 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 蛋白表達(dá)純化鑒定精華 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有194人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 關(guān)于red重組的問題
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 菌落PCR總有幾株菌P不出來該怎么辦
已經(jīng)有4人回復(fù)
- Red重組時(shí)候?yàn)槭裁磿霈F(xiàn)兩條條帶？
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 微生物分子和發(fā)酵方面文章大修求助
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 微生物分子和發(fā)酵方面文章大修求助
已經(jīng)有0人回復(fù)
- TA克隆老是失敗，求高人解惑
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 菌液PCR，酶切鑒定都正確，測序結(jié)果卻不是想要的目的基因，WHY？
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 真菌分子生物學(xué)鑒定方面的問題！微生物新手求助！
已經(jīng)有2人回復(fù)
- 革蘭氏陽性菌怎么做菌落PCR
已經(jīng)有0人回復(fù)
- 其實(shí)，好久我都走偏了
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 同尾酶酶切及連接
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 關(guān)于畢赤酵母表達(dá)
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 關(guān)于酵母表達(dá)
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 關(guān)于重組質(zhì)粒遺傳轉(zhuǎn)化中載體的問題
已經(jīng)有2人回復(fù)
- 菌種生理生化特性
已經(jīng)有3人回復(fù)
★
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-11-20 22:56:45
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-11-20 22:56:45
|
挑菌落時(shí)選平皿上的單菌落，非常小的剛長出的那種，用無菌槍頭刮下，放到10微升的無菌水?dāng)嚢�，外觀看起來稍微有點(diǎn)混濁。然后pcr時(shí)20微體系模板加1～5微就夠了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
10樓2016-11-16 13:04:00
xiaominzheng
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 1219
- 紅花: 1
- 帖子: 8
- 在線: 3小時(shí)
- 蟲號: 5237166
- 注冊: 2016-11-14
- 性別: MM
- 專業(yè): 腫瘤干細(xì)胞
【答案】應(yīng)助回帖
★
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-11-23 22:03:39
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-11-23 22:03:39
|
看大家好多都是用的槍頭挑菌，小建議：用牙簽的尖尖沾一下確定碰著菌就好，然后抖兩下就可以了。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
y38351413138樓2016-11-22 22:31:09
hubeigxkkk
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 27.5
- 紅花: 2
- 帖子: 11
- 在線: 15.2小時(shí)
- 蟲號: 3906545
- 注冊: 2015-06-03
- 專業(yè): 植物生理與生化
23樓2016-11-17 17:33:59
siyuansing
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 296.3
- 散金: 10
- 帖子: 67
- 在線: 14.6小時(shí)
- 蟲號: 2399997
- 注冊: 2013-04-04
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
★
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-11-20 23:00:20
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-11-20 23:00:20
|
我都是挑菌到400ul的LB里，取1ul當(dāng)做模板進(jìn)行PCR，剩下的在37度培養(yǎng)。菌液PCR能做出來的再在試管培養(yǎng)，保種測序。菌液PCR能做出來的都有，做不出來的都沒有。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
36樓2016-11-20 22:07:42
wangxiao318
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 4130.3
- 散金: 50
- 紅花: 1
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 253
- 在線: 76.2小時(shí)
- 蟲號: 2967683
- 注冊: 2014-02-14
- 性別: GG
- 專業(yè): 病原真菌學(xué)
★
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-11-20 22:58:19
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-11-20 22:58:19
|
如果是平板，挑菌時(shí)沾一點(diǎn)就行，不要以肉眼看到作標(biāo)準(zhǔn)，預(yù)變性時(shí)間稍長些，以你的菌種類型來定。如果是搖的菌液，最好是取新鮮的，生長狀態(tài)最好時(shí)的，1微升足矣。另外，實(shí)驗(yàn)時(shí)加上對照，陰性的，陽性的，便于排查。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
26樓2016-11-18 08:15:56
小冀-
版主 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 713 (博后)
- 貴賓: 3.033
- 金幣: 11446.9
- 散金: 1055
- 紅花: 82
- 帖子: 2509
- 在線: 445.9小時(shí)
- 蟲號: 1521695
- 注冊: 2011-12-03
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物信息學(xué)
- 管轄: 微生物
【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2017-01-12 08:22:42
xn8008: 應(yīng)助指數(shù)+1 2017-01-12 08:22:55
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2017-01-12 08:22:42
xn8008: 應(yīng)助指數(shù)+1 2017-01-12 08:22:55
| 挑菌的時(shí)候挑少點(diǎn)，不要太多，否則p出來 |
2樓2016-11-16 08:47:55
【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-11-20 22:56:24
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-11-20 22:56:24
|
挑菌使用鑷子夾取10ul槍頭挑菌 在配好體系的pcr管中沾1-2下即可 會不會是挑菌摳到太多培養(yǎng)基 實(shí)際上菌落并沒有接觸到管中的液體，你的pcr沒有模板所以擴(kuò)不出來 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
3樓2016-11-16 09:02:17
y383514131
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 1275.2
- 帖子: 77
- 在線: 36小時(shí)
- 蟲號: 3477929
- 注冊: 2014-10-15
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
16樓2016-11-17 08:19:33
上官鳳舞
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1153.7
- 散金: 100
- 紅花: 1
- 帖子: 385
- 在線: 20.5小時(shí)
- 蟲號: 5094476
- 注冊: 2016-10-08
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物學(xué)
★
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-11-23 22:04:08
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-11-23 22:04:08
|
陽性菌的話，需要破壁，加溶菌酶作用，或者反復(fù)沸水煮冰上凍，最后離心即可 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
18樓2016-11-17 08:49:37
hattie919822
銀蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 313.1
- 帖子: 24
- 在線: 14.4小時(shí)
- 蟲號: 4062766
- 注冊: 2015-09-10
- 性別: MM
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
32樓2016-11-18 16:52:52
魚》
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1771.2
- 散金: 315
- 紅花: 2
- 帖子: 363
- 在線: 47.2小時(shí)
- 蟲號: 5211401
- 注冊: 2016-11-07
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
33樓2016-11-18 17:10:24
remain2018
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 443.7
- 散金: 220
- 帖子: 340
- 在線: 59.8小時(shí)
- 蟲號: 4884912
- 注冊: 2016-07-31
- 性別: MM
- 專業(yè): 免疫學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2017-01-12 08:23:48
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2017-01-12 08:23:48
|
挑單菌落，一點(diǎn)就夠。然后pcr時(shí)20微體系模板加1微升，實(shí)在P不出來，用特異性引物試試 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
64樓2016-11-30 19:48:48
wenwanhong
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 38.9
- 帖子: 16
- 在線: 4.9小時(shí)
- 蟲號: 2543967
- 注冊: 2013-07-13
- 性別: MM
- 專業(yè): 化學(xué)生物學(xué)與生物有機(jī)化學(xué)
★
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2017-01-12 08:24:22
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2017-01-12 08:24:22
菌落pcr，我一般都是用小槍頭粘一小坨用槍吹打入預(yù)混液當(dāng)中，在pcr儀上99℃10min破菌，然后再加taq酶進(jìn)行pcr，屢試不爽  試一下吧，預(yù)祝成功發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
81樓2016-12-21 16:37:41
緣來是伊
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1640.4
- 散金: 24
- 帖子: 51
- 在線: 75.8小時(shí)
- 蟲號: 2151125
- 注冊: 2012-11-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
★
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2017-01-12 08:24:29
xn8008: 金幣+1, 歡迎發(fā)帖交流 2017-01-12 08:24:29
|
這個(gè)得看你的菌種，如果是大腸的話很容易的，如果是其他尤其是陽性菌的話需要裂解液裂解一下再做 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
88樓2016-12-30 18:49:49
a13515517892
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 74 (初中生)
- 金幣: 4597.6
- 散金: 700
- 紅花: 14
- 帖子: 292
- 在線: 65.3小時(shí)
- 蟲號: 1076526
- 注冊: 2010-08-18
- 專業(yè): 抗體工程學(xué)
5樓2016-11-16 10:56:06
jurkat.1640
至尊木蟲 (文壇精英)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 908 (博后)
- 金幣: 17175
- 散金: 1654
- 紅花: 121
- 沙發(fā): 41
- 帖子: 14525
- 在線: 2184.9小時(shí)
- 蟲號: 514340
- 注冊: 2008-02-28
- 性別: GG
- 專業(yè): 病毒學(xué)
65樓2016-12-01 16:34:24
4樓2016-11-16 09:15:27
y383514131
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 1275.2
- 帖子: 77
- 在線: 36小時(shí)
- 蟲號: 3477929
- 注冊: 2014-10-15
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
6樓2016-11-16 12:39:17
y383514131
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 1275.2
- 帖子: 77
- 在線: 36小時(shí)
- 蟲號: 3477929
- 注冊: 2014-10-15
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
7樓2016-11-16 12:40:06
y383514131
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 1275.2
- 帖子: 77
- 在線: 36小時(shí)
- 蟲號: 3477929
- 注冊: 2014-10-15
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
8樓2016-11-16 12:40:50
y383514131
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 1275.2
- 帖子: 77
- 在線: 36小時(shí)
- 蟲號: 3477929
- 注冊: 2014-10-15
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
9樓2016-11-16 12:42:36
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 y383514131 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 數(shù)一英一271專碩（085401）求調(diào)劑，可跨 +7 | 前行必有光 2026-03-28 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +5 | 崔wj 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑310 +6 | 溫柔的晚安 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 蘆lty 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等調(diào)劑 +7 | 哇呼哼呼哼 2026-03-27 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +15 | hhhhxn.. 2026-03-23 | 21/1050 |
|
|
|
[考研] 【求調(diào)劑】085601材料工程專碩 | 總分272 | +6 | 腳滑的守法公民 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +8 | 張zz111 2026-03-27 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 352分 化工與材料 +5 | 海納百川Ly 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 086000調(diào)劑 +3 | 7901117076 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[有機(jī)交流]
高溫高壓反應(yīng)求助
 10+4
|
chibby 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料292調(diào)劑 +12 | 橘頌思美人 2026-03-23 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 348求調(diào)劑 +4 | 小懶蟲不懶了 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 351求調(diào)劑 +4 | 麥克阿磊 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +6 | wasdssaa 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 085602化學(xué)工程求調(diào)劑。
+4
|
平樂樂樂 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 352求調(diào)劑 +4 | 大米飯！ 2026-03-22 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 086000生物與醫(yī)藥292求調(diào)劑 +6 | 小小陳小小 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 300分，材料，求調(diào)劑，英一數(shù)二 +5 | 超贊的 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 石河子大學(xué)（211、雙一流）碩博研究生長期招生公告 +3 | 李子目 2026-03-22 | 3/150 |
|