 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1501 | 回復(fù): 5 | ||
[求助]
為何小樣誘導(dǎo)有條帶，大量誘導(dǎo)后目的條帶幾乎沒了？ 已有1人參與
|
|
如圖1是預(yù)誘導(dǎo)時的圖，使用的載體是PET-32a，目的蛋白大小約66.2kDa。小樣預(yù)誘導(dǎo)時，由于實驗室內(nèi)的小型超聲波破碎儀壞了，跑的膠是全菌（未破碎），條帶顯示有我的目的條帶，小樣誘導(dǎo)的條件是：先搖菌2.5h-3h后，加IPTG 16° 誘導(dǎo)20h。 然后再大量搖菌，每瓶300ml，IPTG濃度取0.3M，搖菌4h后，加IPTG 16°誘導(dǎo)20h后用大型低溫高壓破碎儀破碎，破碎后發(fā)現(xiàn)有白色的乳狀物體？？（如圖2）然后離心取上清液過鎳柱，用不同濃度咪唑洗脫。 可是跑膠發(fā)現(xiàn)我的目的蛋白濃度很低，甚至不如雜蛋白濃度。尤其是第一個孔那里的上清液中的目的蛋白濃度很低，（如圖3）求助大神，為何小樣誘導(dǎo)時條帶很亮，而大量誘導(dǎo)反而濃度低了？是我大量誘導(dǎo)的條件需要改變還是蛋白在沉淀中表達？如果在沉淀中表達的話，如何才能純化出來呢？謝謝�。� 1.蛋白小樣預(yù)誘導(dǎo)（沒破碎，跑的全菌） 2.蛋白大量破碎后有白色乳狀沉淀 3.大量誘導(dǎo)后過柱圖，上清液中目的蛋白量少 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有208人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學--博士招生
已經(jīng)有2人回復(fù)
-
化學工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有0人回復(fù)
xhw2033696 
銀蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 265.6
- 帖子: 43
- 在線: 17小時
- 蟲號: 6694230
- 注冊: 2017-06-05
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
2樓2017-06-16 10:14:15
3樓2017-06-16 10:31:14
xhw2033696
銀蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 265.6
- 帖子: 43
- 在線: 17小時
- 蟲號: 6694230
- 注冊: 2017-06-05
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
4樓2017-06-16 10:35:40
5樓2017-06-16 17:21:35
6樓2017-06-20 09:16:11
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 我是一只老年 的主題更新
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 359求調(diào)劑 +3 | 王了個楠 2026-03-25 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +5 | plum李子 2026-03-21 | 8/400 |
|
|
[考研] 300分，材料，求調(diào)劑，英一數(shù)二 +5 | 超贊的 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0854AI CV方向招收調(diào)劑 +3 | 章小魚567 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070300化學求調(diào)劑 +9 | 苑豆豆 2026-03-20 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿211 初試270分 求調(diào)劑 +5 | 谷雨上岸 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 361求調(diào)劑 +3 | Glack 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 工科0856求調(diào)劑 +5 | 沐析汀汀 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿南京理工大學085701資源與環(huán)境302分求調(diào)劑 +5 | 葵梓衛(wèi)隊 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 263求調(diào)劑 +6 | yqdszhdap－ 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 石河子大學（211、雙一流）碩博研究生長期招生公告 +3 | 李子目 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 呼呼？~+123456 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +3 | 喜歡還是不甘心 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 336求調(diào)劑 +5 | rmc8866 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求 B區(qū) 調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +12 | 梁梁校校 2026-03-19 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | Mqqqqqq 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +16 | 于海海海海 2026-03-19 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | @taotao 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料考研調(diào)劑 +3 | xwt。 2026-03-19 | 3/150 |
|