 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1509 | 回復: 5 | ||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
[求助]
為何小樣誘導有條帶，大量誘導后目的條帶幾乎沒了？ 已有1人參與
|
||
|
如圖1是預誘導時的圖，使用的載體是PET-32a，目的蛋白大小約66.2kDa。小樣預誘導時，由于實驗室內(nèi)的小型超聲波破碎儀壞了，跑的膠是全菌（未破碎），條帶顯示有我的目的條帶，小樣誘導的條件是：先搖菌2.5h-3h后，加IPTG 16° 誘導20h。 然后再大量搖菌，每瓶300ml，IPTG濃度取0.3M，搖菌4h后，加IPTG 16°誘導20h后用大型低溫高壓破碎儀破碎，破碎后發(fā)現(xiàn)有白色的乳狀物體？？（如圖2）然后離心取上清液過鎳柱，用不同濃度咪唑洗脫。 可是跑膠發(fā)現(xiàn)我的目的蛋白濃度很低，甚至不如雜蛋白濃度。尤其是第一個孔那里的上清液中的目的蛋白濃度很低，（如圖3）求助大神，為何小樣誘導時條帶很亮，而大量誘導反而濃度低了？是我大量誘導的條件需要改變還是蛋白在沉淀中表達？如果在沉淀中表達的話，如何才能純化出來呢？謝謝��！ 1.蛋白小樣預誘導（沒破碎，跑的全菌） 2.蛋白大量破碎后有白色乳狀沉淀 3.大量誘導后過柱圖，上清液中目的蛋白量少 |
回復此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有124人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
-
留學--博士招生
已經(jīng)有15人回復
-
化學工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復
3樓2017-06-16 10:31:14
xhw2033696 
銀蟲 (初入文壇)
- 應助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 265.6
- 帖子: 43
- 在線: 17小時
- 蟲號: 6694230
- 注冊: 2017-06-05
- 專業(yè): 生物大分子結構與功能
2樓2017-06-16 10:14:15
xhw2033696
銀蟲 (初入文壇)
- 應助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 265.6
- 帖子: 43
- 在線: 17小時
- 蟲號: 6694230
- 注冊: 2017-06-05
- 專業(yè): 生物大分子結構與功能
4樓2017-06-16 10:35:40
5樓2017-06-16 17:21:35
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +7 | lin0039 2026-03-26 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +4 | 十閑wx 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 南昌大學材料專碩311分求調(diào)劑 +10 | 77chaselx 2026-03-20 | 10/500 |
|
|
[考研] 材料292調(diào)劑 +11 | 橘頌思美人 2026-03-23 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +9 | 小蠟新筆 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學碩求調(diào)劑 +3 | 崔wj 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085601求調(diào)劑總分293英一數(shù)二 +4 | 鋼鐵大炮 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +4 | 15188958825 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 網(wǎng)絡空間安全0839招調(diào)劑 +4 | w320357296 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理085500機械專業(yè)總分300求調(diào)劑 +3 | an10101 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境學碩288求調(diào)劑 +8 | 皮皮皮123456 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 336求調(diào)劑 +4 | 收到VS 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 接收2026碩士調(diào)劑(學碩+專碩) +4 | allen-yin 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 石河子大學（211、雙一流）碩博研究生長期招生公告 +3 | 李子目 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 生物學調(diào)劑 +5 | Surekei 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +6 | ytter 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +3 | 喜歡還是不甘心 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求助 +5 | 夢里的無言 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料 271求調(diào)劑 +5 | 展信悅_ 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] A區(qū)線材料學調(diào)劑 +5 | 周周無極 2026-03-20 | 5/250 |
|